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1楼 2011-12-06 09:25:21

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Icityman

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【答案】应助回帖

wanhscn: 非应助回帖！ 2011-12-06 14:54:21

我跑的图也是这样，我也想找原因，希望高手帮你解决把

2楼2011-12-06 10:01:09

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翰章

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★
sunmoods(金币+2): 2011-12-07 10:36:10
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-12-08 18:40:29

体系中加入一些BSA试试，电泳的时候最好是有marker对照

3楼2011-12-06 17:24:42

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翰章

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sunmoods(金币+8): 1 2011-12-07 10:36:20
西瓜(金币+1): Good 2011-12-08 18:40:34

还有，94℃ 50S有点长，改为30S试试，因为V3区的目的片段大概是200左右吧

4楼2011-12-06 17:26:00

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sunmoods

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是的，但是考虑有GC夹子所以想延长点变性时间。
我试试30S

5楼2011-12-06 18:07:26

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sagi_qh

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西瓜(金币+2): Good！ 2011-12-06 22:55:57

跑PCR产物电泳怎么着也得点个marker吧。。。。
像楼上的一样建议，加BSA试试看，另外PCR可以用touch down试试看，效果应该比你这个要好

6楼2011-12-06 22:19:00

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叮叮0504

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你们实验室一直用的是这个程序吗？我们做细菌的DGGE一般都是用TOUCHDOWN程序或者你可以选择做V6区，V6区引物特异性强于V3区。

7楼2011-12-07 08:52:28

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叮叮0504

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sunmoods: 回帖置顶 2011-12-07 10:37:08

出现拖尾很有可能是你的模板降解了，

8楼2011-12-07 08:58:05

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julietguo

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西瓜(金币+1): good 2011-12-08 18:42:43

我觉得可能是你加的酶量过多，或者退火温度有点低了

9楼2011-12-07 09:34:46

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sunmoods

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 叮叮0504 at 2011-12-07 08:58:05:
出现拖尾很有可能是你的模板降解了，

这还真有可能，我保存液是用水溶解的