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sunmoods

金虫 (小有名气)

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[求助] 求分析PCR电泳图

细菌16SrDNA  V3区  带GC夹子PCR
94          50S
55          30S
72             30S
25循环
条带拖尾，不知道什么原因，怎么优化，求助

循环30次的时候空白条带很明显

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1楼 2011-12-06 09:25:21

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翰章

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
sunmoods(金币+2): 2011-12-07 10:36:10
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-12-08 18:40:29

体系中加入一些BSA试试，电泳的时候最好是有marker对照

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3楼2011-12-06 17:24:42

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Icityman

铁虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

wanhscn: 非应助回帖！ 2011-12-06 14:54:21

我跑的图也是这样，我也想找原因，希望高手帮你解决把

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2楼2011-12-06 10:01:09

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翰章

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
sunmoods(金币+8): 1 2011-12-07 10:36:20
西瓜(金币+1): Good 2011-12-08 18:40:34

还有，94℃ 50S有点长，改为30S试试，因为V3区的目的片段大概是200左右吧

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4楼2011-12-06 17:26:00

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sunmoods

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是的，但是考虑有GC夹子所以想延长点变性时间。
我试试30S

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5楼2011-12-06 18:07:26

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