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xiaoyang123

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[求助] PCR目的条带没跑出，但是跑出了特异性很强的单一条带，是什么原因呢？

PCR目的条带没跑出，但是跑出了特异性很强的单一条带，是什么原因呢？

其实不是很确定目的基因是否存在，如果存在，目的条带的期望长度是1300bp左右，但是跑出的单一条带却在900bp左右，而且用的是TAKARA HS Taq酶（高特异性Taq酶）……这会是什么原因造成的呢？

高特异性聚合酶是否只是防止突变，并不会减少假阳性呢？

但是跑出了单一带，怎么偏偏不是目的条带呢，太诡异了~~

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1楼2011-11-20 22:04:03

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howbigpig

铁虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

PCR产物直接测序（生工20块，华大25块）然后得到的序列去blast 就可以弄清楚到底是不是目的条带了

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6楼2011-11-23 16:53:54

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zlu520

至尊木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 或许是扩增不完全，可是延伸时间为2min，应该已经比较长了吧，是否有其它原因导致了扩增不完全~~ 2011-11-24 14:35:33

引用回帖:

1楼: Originally posted by xiaoyang123 at 2011-11-20 22:04:03:
PCR目的条带没跑出，但是跑出了特异性很强的单一条带，是什么原因呢？

其实不是很确定目的基因是否存在，如果存在，目的条带的期望长度是1300bp左右，但是跑出的单一条带却在900bp左右，而且用的是TAKARA HS T ...

有可能扩增不完全。。。。

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