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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[求助] PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

其实不是很确定目的基因是否存在,如果存在,目的条带的期望长度是1300bp左右,但是跑出的单一条带却在900bp左右,而且用的是TAKARA HS Taq酶(高特异性Taq酶)……这会是什么原因造成的呢?

高特异性聚合酶是否只是防止突变,并不会减少假阳性呢?

但是跑出了单一带,怎么偏偏不是目的条带呢,太诡异了~~
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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

因为是根据文献合成的,当时blast并没有搜索到匹配度很高的片段,然而暂时没有更好地参照,就完全依照文献合成了。
给文章作者发过Email,他说在公开的GeneBank上可以搜索,但是我在NCBI上确实没有搜到,是否还有其它的GeneBank呢?疑惑……
5楼2011-11-21 09:29:37
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