24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3534  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[求助] PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

其实不是很确定目的基因是否存在,如果存在,目的条带的期望长度是1300bp左右,但是跑出的单一条带却在900bp左右,而且用的是TAKARA HS Taq酶(高特异性Taq酶)……这会是什么原因造成的呢?

高特异性聚合酶是否只是防止突变,并不会减少假阳性呢?

但是跑出了单一带,怎么偏偏不是目的条带呢,太诡异了~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allmessup

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 又一种可能 2011-11-24 14:35:57
引用回帖:
2楼: Originally posted by zlu520 at 2011-11-20 23:51:40:
有可能扩增不完全。。。。

re~如果存在相似度高的序列片段有可能被误以为是复制终点~
Ipsascientiapotestasest.
3楼2011-11-21 07:00:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 或许是扩增不完全,可是延伸时间为2min,应该已经比较长了吧,是否有其它原因导致了扩增不完全~~ 2011-11-24 14:35:33
引用回帖:
1楼: Originally posted by xiaoyang123 at 2011-11-20 22:04:03:
PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

其实不是很确定目的基因是否存在,如果存在,目的条带的期望长度是1300bp左右,但是跑出的单一条带却在900bp左右,而且用的是TAKARA HS T ...

有可能扩增不完全。。。。
无完人!
2楼2011-11-20 23:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moqiyilei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 引物在Genebank上比对匹配度都不高,是直接来自文献的,所以实验一开始就有点空中楼阁的感觉 2011-11-24 14:36:54
引物blast一下,看是否具有特异性。
4楼2011-11-21 09:09:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyang123

金虫 (小有名气)

因为是根据文献合成的,当时blast并没有搜索到匹配度很高的片段,然而暂时没有更好地参照,就完全依照文献合成了。
给文章作者发过Email,他说在公开的GeneBank上可以搜索,但是我在NCBI上确实没有搜到,是否还有其它的GeneBank呢?疑惑……
5楼2011-11-21 09:29:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404 293求调剂 +4 勇远库爱314 2026-04-08 4/200 2026-04-09 08:56 by 保奔超爱学习
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +20 严西西戏 2026-04-06 26/1300 2026-04-08 22:12 by 凯凯要变帅
[考研] 一志愿生物与医药,296分,求调剂 +14 66鹿 2026-04-03 16/800 2026-04-08 10:38 by tjzhao
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +35 lllllos 2026-04-04 39/1950 2026-04-07 23:24 by 一只好果子?
[考研] 336材料与化工085600求调剂 +19 水星记infp 2026-04-05 22/1100 2026-04-07 21:11 by yongzhesheng
[考研] 327考研调剂推荐 +6 呜呜呜呜呢 2026-04-06 6/300 2026-04-06 21:39 by 啵啵啵0119
[考研] 287求调剂 +3 通信学硕081000 2026-04-03 4/200 2026-04-06 21:03 by going home
[考研] 复试调剂 +5 asdasdassda 2026-04-05 5/250 2026-04-06 09:32 by dongzh2009
[考研] 计算机11408,286分求调剂 +7 木子念晞 2026-04-05 7/350 2026-04-05 19:02 by chy09050039
[考研] 考研调剂生寻找导师 +3 顾瞻考研啊 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:18 by 啵啵啵0119
[考研] 324求调剂 +14 想上学求调 2026-04-02 15/750 2026-04-04 20:31 by 无际的草原
[论文投稿] 求文献 5+3 ys879651$ 2026-04-02 3/150 2026-04-04 17:22 by bobvan
[考研] 348分环境工程·调剂 +10 吴彦祖24k 2026-04-03 11/550 2026-04-04 14:19 by 无际的草原
[考研] 材料295 +13 小英11 2026-04-03 14/700 2026-04-04 09:02 by 来看流星雨10
[考研] 350一志愿北京航空航天大学08500材料科学与工程求调剂 +5 kjnasfss 2026-04-03 5/250 2026-04-03 22:29 by 无际的草原
[考研] 0705理学294求调剂 +3 成果成果cg5 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:04 by simons1972
[考研] 土木水利328分求调剂 +6 疾风知劲草666 2026-04-02 6/300 2026-04-03 11:38 by znian
[考研] 312求调剂 +6 小小墨123 2026-04-02 7/350 2026-04-03 07:32 by jsw79
[考研] 346求调剂 +5 郑诚乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 16:38 by SZW_UJN
[考研] 能源动力 调剂 +3 不破不立0 2026-04-02 3/150 2026-04-02 12:46 by ffffjjjj
信息提示
请填处理意见