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C-JingX

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化问题

求助：包涵体纯化，方法是镍柱亲和层析，问题是每次蛋白都在洗杂蛋白时被洗下来，尝试了很多方法，不知道怎么优化？还有个疑问是，组氨酸只有6个，但目的蛋白有100多KDa，会不会是因为蛋白太大，6个组氨酸与镍柱的亲和力无法承受这么大蛋白，就像常用的粘钩一样，挂太重的东西就会直接掉下来呢？？？
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走自己的路，不要追逐别人的脚步！
1楼 2011-09-25 11:19:11
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jiangyhai

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！ 2011-11-08 11:31:38
C-JingX(金币+1): 谢谢！ 2011-11-09 09:51:19
考虑将6xHis换到蛋白的另一端试试。
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静心做事。
8楼2011-11-08 10:42:07
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