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纳兰欣光

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[交流] 3‘RACE inner PCR 电泳结果总是有弥散现象回收条带不成带状什么原因啊？已有11人参与

采用65度退火温度跑两轮3‘RACE PCR 电泳条带多条，并且最大的条带上面很大的弥散带，用的是TAKARA 3‘RACE试剂盒，设计两条上游特异性引物相差117bp,设计原则按照说明书来的，想问问做过3‘RACE的前辈们，这到底什么原因啊？图1为pcr结果，图2为切胶回收结果。

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1楼 2011-09-09 09:10:34

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dhd997

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引用回帖:

9楼: Originally posted by 纳兰欣光 at 2011-09-09 22:14:50:
前一次切胶回收后转化链接，做的菌落PCR用的引物还是第二次PCR的引物，可是结果出来都是比较小的片段，直接送去菌液测序结果为没有信号，所以我就认为是切胶回收的带像是弥散而不是单一带了，没有信号是浓度太小还 ...

像这样，利用引用回复，会给被引用的人一个提示，可以及时反馈你的问题

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