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毕赤酵母表达的蛋白无活性
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各位大虾,我用毕赤酵母KM71和GS115表达我的目的基因(1.8K左右,是酶蛋白),培养5天,每天取样侧活,都没有活性,SDS-PAGE能看到微弱的条带。我是用电转的方法将SacⅠ线性化后的重组质粒导入酵母中的,提取酵母基因组做PCR,用AOX3'和AOX5'做引物,以及特异性引物都能扩出目的条带。现在老板催的紧,心理压力大呀。伤不起伤不起。跪求各位大虾给点建议。谢谢了![]() |
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蛋白表达纯化与检测 |
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