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zhougama

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zhougama(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+6, EPI+1): 2011-07-13 07:52:04
zhougama(金币+5): 2011-07-13 10:21:05
4M的硫酸铵pH值为4.6,在这个酸度下可能会有一些蛋白质变性,要小心。

硫酸铵会破坏蛋白质水化层,最好是缓和地加入。边加入边搅拌,如果在磁力搅拌器上搅拌,小漩涡中心有很多泡沫就表示蛋白质变性,使得溶液粘度增加,泡沫难破,那就很难保证你的蛋白质有没有变性了。

硫酸铵配制成饱和溶液有困难,理论上25度硫酸铵的溶解度为不到80克,饱和溶液是一升的体积内有800克,使得不能溶解的硫酸铵析出,保持100%饱和度。照理说5M(660g/L,远低于溶解度)的浓度是可以配制的,但会出现结晶。所以我认为饱和溶液是很难准确的。而且用饱和溶液来沉淀的时候,假如要达到90%的饱和度,那么蛋白质溶液的体积将要变为原来的10倍,不知道楼主在不在意体积变化。
3楼2011-07-12 23:21:46
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