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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 硫酸铵沉淀蛋白质
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zhougama

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1楼 2011-07-12 21:37:49
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zhougama(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+6, EPI+1): 2011-07-13 07:52:04
zhougama(金币+5): 2011-07-13 10:21:05
4M的硫酸铵pH值为4.6，在这个酸度下可能会有一些蛋白质变性，要小心。

硫酸铵会破坏蛋白质水化层，最好是缓和地加入。边加入边搅拌，如果在磁力搅拌器上搅拌，小漩涡中心有很多泡沫就表示蛋白质变性，使得溶液粘度增加，泡沫难破，那就很难保证你的蛋白质有没有变性了。

硫酸铵配制成饱和溶液有困难，理论上25度硫酸铵的溶解度为不到80克，饱和溶液是一升的体积内有800克，使得不能溶解的硫酸铵析出，保持100%饱和度。照理说5M（660g/L，远低于溶解度）的浓度是可以配制的，但会出现结晶。所以我认为饱和溶液是很难准确的。而且用饱和溶液来沉淀的时候，假如要达到90%的饱和度，那么蛋白质溶液的体积将要变为原来的10倍，不知道楼主在不在意体积变化。
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2011-07-12 23:21:46
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