24小时热门版块排行榜    

查看: 1354  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

生命核心

木虫 (正式写手)

[求助] pcr产物问题请教大家

梯度PCR,50-60退火。其他条件常规,每个温度都有得到产物,设定的产物大小70bp,据marker判断为40-60之间,引物20bp左右,应该不是二聚体,胶浓度3%。多次做结果基本一致,比较疑惑,请教大家!谢谢了!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我的也是同样,只加引物对照显示其实就是引物二聚体,如果产物量高的话,小条带基本就没有了,不影响结果的吧
3楼2011-05-23 18:57:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 有道理 2011-05-23 18:31:39
引用回帖:
Originally posted by 生命核心 at 2011-05-23 16:19:20:
梯度PCR,50-60退火。其他条件常规,每个温度都有得到产物,设定的产物大小70bp,据marker判断为40-60之间,引物20bp左右,应该不是二聚体,胶浓度3%。多次做结果基本一致,比较疑惑,请教大家!谢谢了!

疑惑什么?
如果怕二聚体的话做个空白对照:只加引物。
2楼2011-05-23 17:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生命核心

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by adslye at 2011-05-23 17:05:06:
疑惑什么?
如果怕二聚体的话做个空白对照:只加引物。

谢谢指导 空白对照做了 不是的 目前就只有分子量感觉差10-20bp对不上 这个原因是什么呢 谢谢
4楼2011-05-23 20:34:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生命核心

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by nininini at 2011-05-23 18:57:12:
我的也是同样,只加引物对照显示其实就是引物二聚体,如果产物量高的话,小条带基本就没有了,不影响结果的吧

谢谢建议 作的片断分子量较小 还不是二聚体 就是分子量差10-20bp对不上 这个原因不明
5楼2011-05-23 20:36:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +16 Ldrop2023 2026-08-13 20/1000 2026-08-20 11:07 by xskun
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +13 基诺咪客 2026-08-17 17/850 2026-08-20 10:43 by wangyue2015
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 21/1050 2026-08-20 10:37 by Vivilian
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 125/6250 2026-08-20 09:02 by 医学老男孩
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见