应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切质粒时，怎样鉴定质粒是否被切开了啊？
51/1返回列表
查看: 5306  |  回复: 6
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

11wm11

银虫 (小有名气)

[求助] 酶切质粒时，怎样鉴定质粒是否被切开了啊？

酶切质粒时，怎样鉴定质粒是否被切开了啊？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2011-05-15 06:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

11wm11

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 太极拳 at 2011-05-15 18:42:43:
补充下，你选的酶最好是单切割位点的，并且所连片段中不会有酶切位点。这样效果最好了！最能说明问题！

谢谢~我做同源重组连接。是新手，用的质粒是PHW2000，酶是stul。
赞一下 回复此楼
6楼2011-05-15 21:19:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-05-15 09:48:03
根据说明书，确定酶切条件，温度，时间

一般是2到3个小时，或者难切一点的过夜

完后加入loadingbuffer，跑琼脂糖凝胶电泳，

一般分以下几个孔，
marker ，  原始质粒， 一个酶单切，  另一个单切， 两个酶双切

单切的两个条带一样大小，但是比原始质粒跑的慢

双切的如果有连入片段，就会是两条带，一小一大
如果没有连入片段，应该跟单切位置差不多大
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-15 06:42:44
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5): good 2011-05-15 09:48:16
11wm11(金币+2): 2011-05-15 21:09:19
11wm11(金币+1): 2011-05-17 21:25:16
首先，你提完的质粒跑电泳应该是三条带，等酶切后跑电泳是一条带了。

   如果你连上目的条带，你酶切后的条带大小，应该是质粒大小加目的条带的大小。

   如果你做的双酶切，应该是两条带，一条是你目的条带的大小，一条是质粒大小。
赞一下(1人) 回复此楼
戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
3楼2011-05-15 08:51:28
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-05-15 19:44:31
11wm11(金币+2): 2011-05-15 21:09:36
补充下，你选的酶最好是单切割位点的，并且所连片段中不会有酶切位点。这样效果最好了！最能说明问题！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-05-15 18:42:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭