24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 3602  |  回复: 19

Dancing325

金虫 (正式写手)

[求助] 紫外分光光度法测蛋白酶活 已有2人参与

紫外分光光度法测蛋白酶活:
按下列程序操作:
试管A(空白)                              试管B(酶试样,三个平行试样)
加酶液2.00 mL                                加酶液2.00 mL
40±0.2℃,2min                              40±0.2℃,2min
加三氯乙酸4.00 mL(摇匀)           加酪素2.00mL(已预热)(摇匀)
40±0.2℃,10min(精确计时)      40±0.2℃,10min(精确计时)
加酪素2.00mL(已预热)(摇匀)      加三氯乙酸4.00mL(摇匀)
继续加热10min,过滤或离心           继续加热10min,过滤或离心
于275nm波长,测上清液吸光值       于275nm波长,测上清液吸光值

按以上步骤,紫外测定时,以试管A液作为空白,试管B液吸光度却为负值,请问这是为什么,哪里出现问题了?谢谢!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xiaojiewhk

新虫 (小有名气)

我的测得也是这样,要不就是值很低,不知道哪里出问题了,都怀疑这方法了。
8楼2011-05-24 15:52:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

烟花诺言

铁杆木虫 (职业作家)

木虫诸葛

【答案】应助回帖

空白的与所测样品的比色皿位置放反了
有些事如果不能改变,那么就试着去适应它
2楼2011-05-06 08:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dancing325

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 烟花诺言 at 2011-05-06 08:27:29:
空白的与所测样品的比色皿位置放反了

试管B(酶试样,三个平行试样),三个样都为负值,应该不是你说的这个问题。测了两遍还是一样。
3楼2011-05-06 08:42:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

silicare:编辑内容 2011-05-25 09:00
***********

[ Last edited by silicare on 2011-5-25 at 09:00 ]
4楼2011-05-06 23:07:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smdsfy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

酶液是什么酶啊,酶的底物又是什么啊,两个毫不相干的物质怎么反应啊,怎么测酶活?
5楼2011-05-18 12:16:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

Dancing325(金币+1): 你说的我之前也怀疑过 2011-05-29 15:38:54
活力太低所以测定不出来,测定的系统误差倒是出来了。误差有正有负,你的是负的,说不定什么时候就又是正的了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-05-19 02:08:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

跳跳鱼

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可能对照液的透光度不够  调100时有问题
快乐奋斗,创造所有。
7楼2011-05-19 10:19:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dancing325

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+5): 鼓励反馈!!! 2011-05-30 12:05:34
谢谢大家的建议,我的问题找到了,居然是有个相像的玻璃比色皿冒充石英,悲愤啊!
9楼2011-05-29 15:23:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dancing325

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xiaojiewhk at 2011-05-24 15:52:04:
我的测得也是这样,要不就是值很低,不知道哪里出问题了,都怀疑这方法了。

可能你的酶酶活太低了,或者pH值没调好吧。
10楼2011-05-29 15:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Dancing325 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291分调剂 +8 上岸小莹加油 2026-04-09 9/450 2026-04-15 00:41 by zzzggc
[考研] 290调剂生物0860 +35 哇哈哈,。 2026-04-11 41/2050 2026-04-14 23:47 by Xurambo2014
[考研] 273求调剂 +4 白居不易. 2026-04-09 6/300 2026-04-14 19:54 by 逆水乘风
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +21 hualkop 2026-04-12 22/1100 2026-04-14 17:44 by lhj2009
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +9 河南农业大学-能 2026-04-14 9/450 2026-04-14 16:03 by Art1977
[考研] 求调剂 +16 雪逢冬 2026-04-10 16/800 2026-04-14 14:27 by 逆水乘风
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +8 慕绝cc 2026-04-09 8/400 2026-04-13 14:08 by 张zhihao
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +5 安小满zzz 2026-04-08 5/250 2026-04-12 00:41 by 蓝云思雨
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 346,工科求调剂 +3 moser233 2026-04-09 3/150 2026-04-11 10:04 by zhq0425
[考研] 346,工科0854求调剂,专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
[考研] 22408 366分,本科211,一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +3 LZH(等待调剂中 2026-04-09 3/150 2026-04-09 21:29 by wutongshun
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 085501机械英二77总分294求调剂,接受跨专业学习 +6 守法公民亓纪 2026-04-08 6/300 2026-04-09 15:55 by wp06
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
信息提示
请填处理意见