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Dancing325

金虫 (正式写手)

[求助] 紫外分光光度法测蛋白酶活 已有2人参与

紫外分光光度法测蛋白酶活:
按下列程序操作:
试管A(空白)                              试管B(酶试样,三个平行试样)
加酶液2.00 mL                                加酶液2.00 mL
40±0.2℃,2min                              40±0.2℃,2min
加三氯乙酸4.00 mL(摇匀)           加酪素2.00mL(已预热)(摇匀)
40±0.2℃,10min(精确计时)      40±0.2℃,10min(精确计时)
加酪素2.00mL(已预热)(摇匀)      加三氯乙酸4.00mL(摇匀)
继续加热10min,过滤或离心           继续加热10min,过滤或离心
于275nm波长,测上清液吸光值       于275nm波长,测上清液吸光值

按以上步骤,紫外测定时,以试管A液作为空白,试管B液吸光度却为负值,请问这是为什么,哪里出现问题了?谢谢!
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xiaojiewhk

新虫 (小有名气)

我的测得也是这样,要不就是值很低,不知道哪里出问题了,都怀疑这方法了。
8楼2011-05-24 15:52:04
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xiaojiewhk

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by Dancing325 at 2011-05-29 15:33:16:
可能你的酶酶活太低了,或者pH值没调好吧。

恩,可能是pH的事,给一个老师做的,也没多看,后来他跟我提过一点。谢谢你啊
13楼2011-05-29 20:47:07
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