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fanglove0o0

金虫 (小有名气)

[求助] 酶偶联法测酶活力,怎么计算啊

酶偶联方法测某种酶的活力,偶联了NADH的消耗,1U定义为每分钟消耗1umolNADH,有计算公式吗? 酶量是200ul体系中加入20ug酶,求高手指点。。。。。急急急!!!!!
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fanglove0o0: 金币+2, 有帮助 2012-04-23 20:41:26
NADH的消耗不难测定呀,NADH的浓度的分光光度测定在340纳米处进行。我昨天上午正好和别人讨论一种NADH的浓度的分光光度测定酯酶和脂肪酶检测的题目,我在上来时(最迟本周六)把SCI原始论文发上来,你按照SCI原始论文中的实验流程做起来。你可以把这问题的链接用站内信件发给我,以便我能够方便的找到。
2楼2012-04-23 00:42:57
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

论文来了,有公式,请假附件。

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  • 附件 1 : 20084392717141.pdf
  • 2012-04-23 11:48:31, 256.36 K
3楼2012-04-23 11:48:41
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nieqin138220

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我买过一个试剂盒里面有计算公式,你看看:
酶活力(U/g)= (△A/6.22 )× ( Vt/Vs ) ÷反应时间÷比色光径 ÷匀浆蛋白含量
6.22:NADH的毫摩尔吸光系数
△A:两次OD值之差
( Vt/Vs ) :反应体系中样品稀释倍数
匀浆蛋白含量:g/ml
不抛弃理想,不放弃努力
4楼2012-04-23 13:17:25
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fanglove0o0

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-23 00:42:57:
NADH的消耗不难测定呀,NADH的浓度的分光光度测定在340纳米处进行。我昨天上午正好和别人讨论一种NADH的浓度的分光光度测定酯酶和脂肪酶检测的题目,我在上来时(最迟本周六)把SCI原始论文发上来,你按照SCI原始 ...

看了文章再讨论。。先谢过了~~~~
5楼2012-04-23 20:43:29
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

一些Enzyme-coupled assays相关的SCI文献。

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6楼2012-04-24 23:15:07
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fanglove0o0

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-24 23:15:07:
一些Enzyme-coupled assays相关的SCI文献。

太感谢了!!!!!
7楼2012-04-26 21:51:15
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

推荐你本测定酶活力的参考书:B.施特尔马赫 著,钱嘉源 译,酶的测定方法,中国轻工业出版社,1992,书中有31种常见的酶的活力测定方法,每种酶又不止一种方法,更重要的是,每种测定方法都给出了完整的Protocols,而且都有酶活力测定公式,还附加每种酶的没活力具体测定实例,非常通俗易懂,但是我没有电子版。
8楼2012-04-27 00:17:36
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fanglove0o0

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-27 00:17:36:
推荐你本测定酶活力的参考书:B.施特尔马赫 著,钱嘉源 译,酶的测定方法,中国轻工业出版社,1992,书中有31种常见的酶的活力测定方法,每种酶又不止一种方法,更重要的是,每种测定方法都给出了完整的Protocols ...

谢谢啊
9楼2012-04-27 20:12:39
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mareone

铁虫 (小有名气)

你好,NADH是线粒体呼吸链中能量产生的控制标记物。NADH 氧化还原状态对细胞内氧水平和组织内能量消耗非常敏感。MitoViewer线粒体观测仪能够提供由NADH荧光评价的活体细胞实时线粒体运转信息。而且有专业软件分析。如果你想进一步了解,请给我写email :yanming@nbl.com.cn
欲善其工,必利其器。
10楼2012-05-07 13:35:48
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