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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 【求助】脂肪酶活力测定
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清水塘

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】脂肪酶活力测定 已有5人参与

从深圳绿微康公司买了一袋酿酒用的脂肪酶，标签上有酶活单位是2000U/g，但放了很长时间，老板想让我测测酶活，不知道该怎样测啊？
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1楼 2010-09-15 20:32:34
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柳飞绵

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
冰雪灵魂(金币+1):太详细了~~ 2010-09-19 12:13:30
http://www.bioon.com.cn/protocol/showarticle.asp?newsid=11048
1、粗酶液的制备

用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸馏水溶解并定容至100 mL， 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。

2、实验设计

本实验以10 mL色拉油为底物，以酶用量、水解温度、反应时间为因素，通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。

3、酸价的测定

酸价是指中和1 mol游离脂肪酸所需NaOH的毫克数， 它用于衡量油脂的水解程度。实验中用酸碱滴定法测定水解液的酸价， 参照文献[ 3， 4 ]中所使用的方法， 向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液， 摇匀， 终止反应， 并加入2滴酚酞指示剂， 迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色， 在30 s内不消失为终点， 记录消耗的NaOH溶液毫升数(V ) 。用同样的方法测定空白值， 每个试验重复两次， 以平均值作为测定结果。

酸价按下式计算：
X = C (V - V0 ) ×40 /M
式中: X —油脂酸价(mgNaOH /g油)
C—NaOH标准溶液的浓度(mol/L)
M —试样的质量( g)
40—NaOH的mmol质量(mg/mmol)

4 粗脂肪酶活力的测定

在最佳水解条件下， 分别测得粗脂肪酶和标准脂肪酶水解液的酸价X1、X2 ， 根据公式U1 /U= X1 / X2求得粗脂肪酶的活力， 其中U1为粗脂肪酶活力， U为标准脂肪酶活力。

5标准脂肪酶液的配制

根据实验最佳条件， 配制标准脂肪酶液。一篇相关文献 粗脂肪酶活力的测定方法的研究.pdf
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饮半盏当知江河滋味，拾一叶尽显人间秋凉
2楼2010-09-16 10:01:53
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yiqiedouok

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以考虑紫外分光光度计
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我需要改变
3楼2010-09-18 20:40:00
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红景天水

木虫 (正式写手)
★ ★
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冰雪灵魂(金币+1):谢谢给予解答~~ 2010-09-19 12:13:50
有个轻工行业的标准的
里面方法步骤都有的
你搜搜看
QB开头的
好像名字是工业酶制剂
我忘记了
以前就是用这个方法测得
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4楼2010-09-19 12:11:53
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sdjnwhz

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
学习，看看我的酶适合用这种方法么
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学习充电
5楼2010-11-29 15:20:57
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10809036

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
不同的脂肪酶用不同的方法测，你可以选择让专业部门去测。这样可以省很多时间。我们是用分光光度计，配上酶的底物。
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想要走得快，就单独上路；想要走得远，就结伴同行！！
6楼2011-05-23 15:55:56
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