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清水塘

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】脂肪酶活力测定 已有5人参与

从深圳绿微康公司买了一袋酿酒用的脂肪酶,标签上有酶活单位是2000U/g,但放了很长时间,老板想让我测测酶活,不知道该怎样测啊?
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sdjnwhz

木虫 (著名写手)

★
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学习,看看我的酶适合用这种方法么
学习充电
5楼2010-11-29 15:20:57
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查看全部 6 个回答

柳飞绵

木虫 (著名写手)

★ ★
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冰雪灵魂(金币+1):太详细了~~ 2010-09-19 12:13:30
http://www.bioon.com.cn/protocol/showarticle.asp?newsid=11048
1、粗酶液的制备

用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。

2、实验设计

本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。

3、酸价的测定

酸价是指中和1 mol游离脂肪酸所需NaOH的毫克数, 它用于衡量油脂的水解程度。实验中用酸碱滴定法测定水解液的酸价, 参照文献[ 3, 4 ]中所使用的方法, 向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液, 摇匀, 终止反应, 并加入2滴酚酞指示剂, 迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色, 在30 s内不消失为终点, 记录消耗的NaOH溶液毫升数(V ) 。用同样的方法测定空白值, 每个试验重复两次, 以平均值作为测定结果。

酸价按下式计算:
X = C (V - V0 ) ×40 /M
式中: X —油脂酸价(mgNaOH /g油)
C—NaOH标准溶液的浓度(mol/L)
M —试样的质量( g)
40—NaOH的mmol质量(mg/mmol)

4 粗脂肪酶活力的测定

在最佳水解条件下, 分别测得粗脂肪酶和标准脂肪酶水解液的酸价X1、X2 , 根据公式U1 /U= X1 / X2求得粗脂肪酶的活力, 其中U1为粗脂肪酶活力, U为标准脂肪酶活力。

5标准脂肪酶液的配制

根据实验最佳条件, 配制标准脂肪酶液。一篇相关文献 粗脂肪酶活力的测定方法的研究.pdf
饮半盏当知江河滋味,拾一叶尽显人间秋凉
2楼2010-09-16 10:01:53
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yiqiedouok

银虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以考虑紫外分光光度计
我需要改变
3楼2010-09-18 20:40:00
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红景天水

木虫 (正式写手)

★ ★
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冰雪灵魂(金币+1):谢谢给予解答~~ 2010-09-19 12:13:50
有个轻工行业的标准的
里面方法步骤都有的
你搜搜看
QB开头的
好像名字是工业酶制剂
我忘记了
以前就是用这个方法测得
4楼2010-09-19 12:11:53
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