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清水塘木虫 (小有名气)
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【求助】脂肪酶活力测定 已有5人参与
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| 从深圳绿微康公司买了一袋酿酒用的脂肪酶，标签上有酶活单位是2000U/g，但放了很长时间，老板想让我测测酶活，不知道该怎样测啊？ |
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柳飞绵
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
冰雪灵魂(金币+1):太详细了~~ 2010-09-19 12:13:30
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http://www.bioon.com.cn/protocol/showarticle.asp?newsid=11048 1、粗酶液的制备 用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸馏水溶解并定容至100 mL， 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。 2、实验设计 本实验以10 mL色拉油为底物，以酶用量、水解温度、反应时间为因素，通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。 3、酸价的测定 酸价是指中和1 mol游离脂肪酸所需NaOH的毫克数， 它用于衡量油脂的水解程度。实验中用酸碱滴定法测定水解液的酸价， 参照文献[ 3， 4 ]中所使用的方法， 向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液， 摇匀， 终止反应， 并加入2滴酚酞指示剂， 迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色， 在30 s内不消失为终点， 记录消耗的NaOH溶液毫升数(V ) 。用同样的方法测定空白值， 每个试验重复两次， 以平均值作为测定结果。 酸价按下式计算： X = C (V - V0 ) ×40 /M 式中: X —油脂酸价(mgNaOH /g油) C—NaOH标准溶液的浓度(mol/L) M —试样的质量( g) 40—NaOH的mmol质量(mg/mmol) 4 粗脂肪酶活力的测定 在最佳水解条件下， 分别测得粗脂肪酶和标准脂肪酶水解液的酸价X1、X2 ， 根据公式U1 /U= X1 / X2求得粗脂肪酶的活力， 其中U1为粗脂肪酶活力， U为标准脂肪酶活力。 5标准脂肪酶液的配制 根据实验最佳条件， 配制标准脂肪酶液。一篇相关文献 粗脂肪酶活力的测定方法的研究.pdf |
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