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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 紫外分光光度法测蛋白酶活
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Dancing325

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by smdsfy at 2011-05-18 12:16:01:
酶液是什么酶啊，酶的底物又是什么啊，两个毫不相干的物质怎么反应啊，怎么测酶活？

中性蛋白酶，底物是干酪素（一般要求酪素，纯度高）。
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11楼2011-05-29 15:36:33
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
居然是这个原因啊
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
12楼2011-05-29 16:17:31
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xiaojiewhk

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by Dancing325 at 2011-05-29 15:33:16:
可能你的酶酶活太低了，或者pH值没调好吧。

恩，可能是pH的事，给一个老师做的，也没多看，后来他跟我提过一点。谢谢你啊
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13楼2011-05-29 20:47:07
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Dancing325

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaojiewhk at 2011-05-29 20:47:07:
恩，可能是pH的事，给一个老师做的，也没多看，后来他跟我提过一点。谢谢你啊

有段时间没来了。我也只是提个建议了，相互照顾么～
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14楼2011-06-30 23:28:12
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baobeiqianxi

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果酶活低的话，除了你现在做的对照组、实验组外，可加入一个空白组（空白组就是你绘制标准曲线时所用的空白组），这样可使你测得的对照组、实验组的OD值在0.2~0.8的可信度范围内！
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15楼2012-06-08 10:38:11
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lare77

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我以前跟你一样 把玻璃的跟石英的搞混了，因为玻璃在275nm左右自身会有吸光值，而在680nm处时，玻璃比色皿对于结果的测量的影响就不那么大了。
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16楼2012-10-15 09:29:00
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Dancing325

金虫 (正式写手)
引用回帖:
1581615楼: Originally posted by lare77 at 2012-10-15 09:29:00
我以前跟你一样 把玻璃的跟石英的搞混了，因为玻璃在275nm左右自身会有吸光值，而在680nm处时，玻璃比色皿对于结果的测量的影响就不那么大了。

嗯，好在我们都找到原因了，不然让石英和玻璃绊倒就太不值得了。
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17楼2012-10-16 20:02:10
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你百度一下 关键词是紫外+石英
石英是纯的二氧化硅，一般玻璃含硅酸钠杂质
紫外穿不过一般玻璃
紫外波长在300nm以下。？那个界限忘了
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谢谢你给我信心与力量，我会努力！
18楼2012-10-17 19:20:07
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toni1106

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你做酪氨酸标曲了么？275处测定时，50ug/mll酪氨酸有吸光度没？？？标曲K值合适不？我测得时候100ug/ml吸光度才0.4， ，50ug/ml就是0了，，
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19楼2016-05-26 14:18:53
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郑丽君-CC

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by Dancing325 at 2011-05-29 15:23:54
谢谢大家的建议，我的问题找到了，居然是有个相像的玻璃比色皿冒充石英，悲愤啊！

680nm就是用玻璃比色皿吧
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20楼2017-01-15 20:01:08
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