| 查看: 3480 | 回复: 7 | |||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
丝状真菌的基因敲除
|
|||
|
我最近要敲除掉曲霉里面的两个基因，大概的方案如下： 单独敲除1基因，单独敲除2基因，以及将两个基因都敲除，来研究他们的功能。单独敲除一个基因的载体我都获得了，是通过农杆菌介导转化的，可是不知道如何来进行基因的双敲除载体的构建，不知道真菌里面有没有双交换的概念。有没有做真菌基因敲除的高手啊，真是不慎感激啊！ |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂
已经有4人回复
-
一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂
已经有33人回复
-
一志愿中国科学院上海有机所，有机化学356分找调剂
已经有12人回复
-
071000生物学，一志愿深圳大学296分，求调剂
已经有14人回复
-
0854调剂
已经有12人回复
-
材料与化工调剂
已经有37人回复
-
271求调剂
已经有23人回复
-
材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组
已经有11人回复
-
化工学硕294分，求导师收留
已经有14人回复
-
2026 WR青拔
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 真菌基因组提取
已经有6人回复
- PEG介导原生质体遗传转化的问题，求高手解答！！
已经有8人回复
- 一株芽孢杆菌的DNA提取问题
已经有6人回复
- 请问哪个实验室有丝状真菌表达系统
已经有5人回复
- 真菌转化子PCR验证问题
已经有20人回复
- 关于丝状真菌RNA的提取问题，谢谢
已经有1人回复
- 发酵液中总是染丝状真菌的原因探讨
已经有9人回复
- EPS 非丝状菌 生物泡沫
已经有15人回复
- 转化真菌后，怎么鉴定转化子？目的基因是从该真菌克隆出来的
已经有5人回复
- 如何把中药提取液做成膏状化妆品，要添加什么东东啊
已经有15人回复
- 请教：这个可能是什么丝状真菌
已经有9人回复
- 敲基因小鼠年龄大不生育
已经有3人回复
- 基因敲除转化子验证
已经有5人回复
- 求问真菌中有哪些存在多核现象的？
已经有6人回复
- 如何寻找基因的启动子和终止子？
已经有3人回复
- 如何做同源重组
已经有6人回复
- 蛋白酶基因表达，用的Bacillus subtilis系统，但总是表达不出，求高人指点……
已经有19人回复
- 丝状真菌提取总DNA问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】基因功能验证
已经有8人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母URA3基因敲除的问题
已经有30人回复
- 【求助/交流】关于基因敲除的方法
已经有18人回复
- 【求助/交流】哪里有卖丝状真菌表达系统的？
已经有4人回复
- 【求助】污泥膨胀，求丝状菌照片
已经有7人回复
- 细菌同源重组进行基因敲除的同源臂最小需要多少
已经有10人回复
jinkui960
至尊木虫 (知名作家)
- MicEPI: 13
- 应助: 1220 (讲师)
- 金币: 10246.5
- 散金: 1000
- 红花: 42
- 沙发: 1
- 帖子: 5797
- 在线: 517.3小时
- 虫号: 1327313
- 注册: 2011-06-20
- 性别: GG
- 专业: 生物防治
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5, EPI+1): 欢迎常来交流 2011-06-27 20:12:56
scelab(金币+5, EPI+1): 欢迎常来交流 2011-06-27 20:12:56
|
尽管你构建了敲除一个基因的载体，但看来你不太明白敲除的原理，真菌基因敲除一般是基于同源重组技术的，也有基于随机插入突变的。基因敲除方法可以参考文献：“A high-throughput gene knockout procedure for Neurospora reveals functions for multiple transcription factors. Proc Natl Acad Sci USA 103: 10352–10357.” 建议你认真研究一下你自己构建载体的原理，如果你要进行双敲除的话，得选择另一个筛选标记，如hph和Bar等，载体构建的方法和你敲除基因1的方法是相同的，只是把筛选标记换成另一种！ 祝好运！ |
7楼2011-06-27 19:21:25
syn1985
木虫 (正式写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2765.5
- 散金: 60
- 红花: 3
- 帖子: 578
- 在线: 273.2小时
- 虫号: 463029
- 注册: 2007-11-19
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
2楼2011-05-03 17:18:20
zff912
金虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 773.9
- 散金: 118
- 帖子: 119
- 在线: 112.6小时
- 虫号: 1153836
- 注册: 2010-11-23
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
3楼2011-05-25 17:06:22
gumingzhu
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1362.8
- 红花: 1
- 帖子: 982
- 在线: 89.8小时
- 虫号: 1318801
- 注册: 2011-06-09
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
4楼2011-06-27 14:11:28
20