24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3478  |  回复: 7
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ldy-529

银虫 (小有名气)

[求助] 丝状真菌的基因敲除

我最近要敲除掉曲霉里面的两个基因,大概的方案如下:
单独敲除1基因,单独敲除2基因,以及将两个基因都敲除,来研究他们的功能。单独敲除一个基因的载体我都获得了,是通过农杆菌介导转化的,可是不知道如何来进行基因的双敲除载体的构建,不知道真菌里面有没有双交换的概念。有没有做真菌基因敲除的高手啊,真是不慎感激啊!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zff912

金虫 (小有名气)

楼主  很羡慕你都做到功能验证这步 我是刚开始转化 用的也是农杆菌介导转化的方法  有个问题想请教你  农杆菌放在-20会不会影响其活性  我做的转化一直不稳定 时而好时而坏的 也不知道原因
No matter how far you may fly, never forget where you come from
3楼2011-05-25 17:06:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

syn1985

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

ldy-529(金币+5): 虽然我的金币不多,还是派给你吧! 2011-05-03 18:10:22
我也在进行这方面的研究,不过做的不是真菌而是放线菌,因为工作还未做到那一步所以经验肯定没有LZ足,有点个人的观点:不知道这两个基因是否在一个基因簇上?如果要同时敲除两个基因,可否试试同时转染两种质粒载体呢?
2楼2011-05-03 17:18:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gumingzhu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by syn1985 at 2011-05-03 17:18:20:
我也在进行这方面的研究,不过做的不是真菌而是放线菌,因为工作还未做到那一步所以经验肯定没有LZ足,有点个人的观点:不知道这两个基因是否在一个基因簇上?如果要同时敲除两个基因,可否试试同时转染两种质粒载 ...

你好,想问一下你敲除用的什么方法转化,原生质体,电转化,还是结合转移,最近也在做放线菌敲除,纠结中
改掉一个旧习惯有多难????
4楼2011-06-27 14:11:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by gumingzhu at 2011-06-27 14:11:28:
你好,想问一下你敲除用的什么方法转化,原生质体,电转化,还是结合转移,最近也在做放线菌敲除,纠结中

我用的是接合转移 选个质粒试一试就知道了 何必纠结
5楼2011-06-27 18:31:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 327求调剂 +14 Xxjc1107. 2026-04-06 14/700 2026-04-13 08:31 by Delta2012
[考研] 2本,初试303,0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 280求调剂 +13 wzzz王 2026-04-09 13/650 2026-04-12 00:31 by 勇攀高峰0126
[考研] 290求调剂 +13 luoziheng 2026-04-10 13/650 2026-04-11 23:15 by labixiaoqiao
[考研] 一志愿厦大0856,306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 269求调剂 +11 啊啊我我 2026-04-07 11/550 2026-04-11 16:45 by vgtyfty
[考研] 一志愿211,化学310分,本科重点双非,求调剂 +23 努力奋斗112 2026-04-08 23/1150 2026-04-10 23:29 by 314126402
[考研] 302分求调剂 +9 凡语祈愿 2026-04-08 10/500 2026-04-10 23:26 by 314126402
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[考研] 一志愿中科院105500专业总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 7/350 2026-04-09 17:51 by lallalh
[考研] 311求调剂 +6 surte 2026-04-08 13/650 2026-04-09 14:00 by surte
[考研] 293分求调剂,外语为俄语 +7 加一一九 2026-04-07 10/500 2026-04-08 20:14 by yutian743
[考研] 一志愿哈工大,初试329,求环境科学与工程调剂! +11 余未辛 2026-04-06 11/550 2026-04-08 15:21 by screening
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
[考研] 本科生物信息学,总分362 求07 08调剂 +6 q小倩1210 2026-04-06 6/300 2026-04-07 19:40 by macy2011
信息提示
请填处理意见