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求助 原核表达WB 多条带已有5人参与
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我用的是PET-28,在BL21中的表达,IPTG 0.5mM 诱导4h,菌体制样SDS-PAGE和WB,page胶考染没有差异条带,WB检测时却有多条带,并且比预计大(20kd》10kd) 我换过载体和表达菌株都出现了这个问题!!请问大侠们是什么问题啊??!!! 自己分析:我的片段含有多对二硫键,80个aa中含有24个CYS ,是否可能是二硫键太多形成了多聚体,多聚体之间又因为二硫键的断裂而形成大小不一的单体??? |
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