应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助 原核表达WB 多条带
51/1返回列表
查看: 2342  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wyhwawj_87

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助 原核表达WB 多条带 已有5人参与

我用的是PET-28，在BL21中的表达，IPTG 0.5mM 诱导4h，菌体制样SDS-PAGE和WB,page胶考染没有差异条带，WB检测时却有多条带，并且比预计大（20kd》10kd） 我换过载体和表达菌株都出现了这个问题！！请问大侠们是什么问题啊？？！！！

  自己分析：我的片段含有多对二硫键，80个aa中含有24个CYS ,是否可能是二硫键太多形成了多聚体，多聚体之间又因为二硫键的断裂而形成大小不一的单体？？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
好想好想啊 ~~~
1楼 2011-05-03 14:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyhwawj_87

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by elvias at 2011-05-03 15:12:41:
除了多聚体的原因，你的一抗是否特异性很强，你收否做了空菌裂解液的WB？

我做了PET-28空载转化BL21的WB,没有条带啊
赞一下 回复此楼
好想好想啊 ~~~
7楼2011-05-05 11:21:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

xuguanghai

木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+1): 可以详细一点 2011-05-03 16:14:47
加1mmol的DTT再做看看
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-05-03 14:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elvias

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+2): 很有建设性 2011-05-03 16:15:45
除了多聚体的原因，你的一抗是否特异性很强，你收否做了空菌裂解液的WB？
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-05-03 15:12:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qjy_134

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+2): 有理 2011-05-03 21:06:45
要不就是实验没做好，最大是你的抗体不好用，楼主的抗体是自己做的嘛？
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-05-03 20:48:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工306 +7 z1z2z3879 2026-03-21 7/350 2026-03-26 17:59 by fmesaito
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 296求调剂 +5 www_q 2026-03-20 5/250 2026-03-26 12:56 by 3Strings
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 材料学硕，求调剂 6+4 糖葫芦888ll 2026-03-22 9/450 2026-03-25 11:19 by greychen00
[考研] 07化学280分求调剂 +7 722865 2026-03-23 7/350 2026-03-25 09:29 by aa331100
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭