| 查看: 3071 | 回复: 7 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
js_yangbin金虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助】酶的提取缓冲液的问题 已有5人参与
|
||
|
最近看了一些蛋白质提取相关的文献，经常会看到类似于下面的一些描述：取20 g西兰花种子，用液氮研磨成粉末，加60 mL提取缓冲液(O.2 mol／L Tris—HCI缓冲液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)。搅拌均匀后用8层纱布过滤，滤液在4℃下，12000 g离心20 min，收集 上清液作为黑芥子酶租提液(摘自一篇硕士论文) 其中60 mL提取缓冲液(O.2 mol／L Tris—HCI缓冲液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)看不明白啊，这个提取液是怎么配制的啊？ |
回复此楼» 猜你喜欢
放榜前的不淡定
已经有18人回复
-
在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。
已经有4人回复
-
某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感
已经有7人回复
-
什么时候开奖？
已经有13人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有8人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有10人回复
-
人气不行了
已经有11人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有22人回复
-
导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！
已经有3人回复
-
2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问酶切缓冲液的保存及使用问题!
已经有3人回复
- 测酶活的蛋白怎么保存
已经有3人回复
- 一个可以从从缓存中提取视频 观看的软件
已经有19人回复
- 提取DNA时用的TE裂解液和TE缓冲液的区别？
已经有10人回复
- CAT POD SOD测定中提取液的问题
已经有14人回复
- Tris-HCl和PBS缓冲液的区别和用途
已经有7人回复
- 用pH6.5缓冲液和PVPP提取多酚氧化酶，测酶活的时候为什么吸光度随时间逐渐降低呢
已经有12人回复
- 如何制备粗酶液啊？
已经有8人回复
- 求助 PMSF 缓冲液使用量
已经有13人回复
- 求助：过氧化物酶提取及活性测定，颜色、吸光度都无变化
已经有9人回复
- 请问各位，研究酶体外活性时，如何选择合适的缓冲体系？
已经有6人回复
- 植物PAL及CAT两种酶测定中遇到的问题
已经有13人回复
- 关于测定植物CAT的问题
已经有19人回复
- 溶菌酶缓冲液怎么配的
已经有10人回复
- 求助微生物琥珀酸脱氢酶测定问题
已经有11人回复
- 基因组提取过程中加入溶菌酶有白色沉淀
已经有13人回复
- 酶低温保存问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】有关磷酸盐缓冲液的问题PBS和PB的区别
已经有14人回复
- 【求助/交流】为什么用酶最适PH缓冲液提酶酶没有活性？
已经有13人回复
- 【求助】蛋白提取率的问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】DNA提取缓冲液的问题（乳白色还是澄清）
已经有13人回复
js_yangbin
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 397.7
- 散金: 220
- 红花: 4
- 沙发: 1
- 帖子: 365
- 在线: 228.5小时
- 虫号: 792235
- 注册: 2009-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2011-04-14 11:34:37
js_yangbin
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 397.7
- 散金: 220
- 红花: 4
- 沙发: 1
- 帖子: 365
- 在线: 228.5小时
- 虫号: 792235
- 注册: 2009-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2011-04-14 09:40:30
reasonspare
木虫 (著名写手)
- BioEPI: 10
- 应助: 0 (幼儿园)
- 贵宾: 0.894
- 金币: 2137.1
- 红花: 11
- 帖子: 1909
- 在线: 72.5小时
- 虫号: 180928
- 注册: 2006-02-10
- 专业: All in one
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+5, EPI+1): 专业 2011-04-14 11:42:45
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+5, EPI+1): 专业 2011-04-14 11:42:45
|
问： 其中60 mL提取缓冲液(O.2 mol／L Tris—HCI缓冲液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)看不明白啊，这个提取液是怎么配制的啊？ 如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量 将Tris-HCl 配成1M （或者0.5M）, 调整pH7.5，灭菌备用 如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量 EDTA 配成1M 或者0.1M 备 灭菌用 如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量 3 mmol／L DTT， 可配成100mM的母液，分装-20保存 如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量 5％甘油，为体积比 0.1mmo/L PMSF， 可以配成母液，也可以直接计算晶体用量 |
3楼2011-04-14 11:21:43
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- BioEPI: 14
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
5楼2011-04-14 11:45:28
20
