【求助】酶的提取缓冲液的问题 - 生物科学 - 小木虫论坛-学术科研互动平台

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木虫 (著名写手)

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silicare(金币+5, EPI+1): 专业 2011-04-14 11:42:45

引用回帖:

Originally posted by js_yangbin at 2011-04-14 09:36:36:
最近看了一些蛋白质提取相关的文献，经常会看到类似于下面的一些描述：取20 g西兰花种子，用液氮研磨成粉末，加60 mL提取缓冲液(O.2 mol／L
Tris—HCI缓冲液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／ ...

问：

其中60 mL提取缓冲液(O.2 mol／L Tris—HCI缓冲液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)看不明白啊，这个提取液是怎么配制的啊？
如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量

将Tris-HCl 配成1M （或者0.5M）, 调整pH7.5，灭菌备用
如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量

EDTA 配成1M 或者0.1M 备灭菌用
如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量

3 mmol／L DTT，
可配成100mM的母液，分装-20保存
如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量

5％甘油，为体积比

0.1mmo/L PMSF，可以配成母液，也可以直接计算晶体用量