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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 溶菌酶缓冲液怎么配的
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小小甜児

金虫 (正式写手)

[求助] 溶菌酶缓冲液怎么配的 已有1人参与

因为我们实验室第一次用分子的方法，没人给我意见，所以在这弱弱的问问各位大师，溶菌酶缓冲液你们都怎么配的，我看到DNA提取试剂盒上的说明书说的是20mM Tris,2mM EDTA，1.2%Tritonx-100，终浓度20mg/ml的溶菌酶缓冲液。我按着这个计算了配方中各试剂的用量，可是我把溶菌酶加进去，溶菌酶不溶解呀，求各位大师帮忙解惑答疑。
PS：你们平常用的配方的试剂用量是多少，怎么配滴呀
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1楼 2011-11-15 09:58:33
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

溶菌酶直接用无菌的双蒸水溶解就行了，配制成10mg/ml 的浓度
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6楼2011-11-15 19:00:41
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普通回帖

八爪

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

将配好的溶菌酶缓冲液超声几分钟，效果可能好一些
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2楼2011-11-15 10:11:34
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

好像分子克隆上有...具体的忘记了。

你加加热或多晃晃看溶溶。。。
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伟大航线....
3楼2011-11-15 10:21:11
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小小甜児

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 八爪 at 2011-11-15 10:11:34:
将配好的溶菌酶缓冲液超声几分钟，效果可能好一些

那酶会不会失活啊？
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4楼2011-11-15 10:21:54
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小小甜児

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by longrna at 2011-11-15 10:21:11:
好像分子克隆上有...具体的忘记了。

你加加热或多晃晃看溶溶。。。

我还想着能不能37度水浴会，可是又怕对酶有影响~
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在这个幽静的夜晚里，我给自己打了几个电话，打给过去的我，同她聊聊往事，打给未来的我，与她谈谈心事，打给现在的我，问问她最近过的如何~
5楼2011-11-15 10:22:59
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by yesucao at 2011-11-15 19:00:41:
溶菌酶直接用无菌的双蒸水溶解就行了，配制成10mg/ml 的浓度

然后分装到小EP管中，保存于-20度冰箱，用的时候取出其中一管加适量体积至相应的浓度就行了
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7楼2011-11-15 19:02:42
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虫子吃草

新虫 (初入文坛)
按照试剂盒上面我不知道怎么配制，我听前辈说是直接配制的tris-hcl（20nmol/L，pH8.0）作为缓冲液溶解溶菌酶，终含量为20mg/ml
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8楼2012-04-25 11:53:02
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虫子吃草

新虫 (初入文坛)
溶菌效果一般...只是感觉最后提出来的DNA有所降解....
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9楼2012-04-25 11:54:03
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passionxiao

金虫 (正式写手)
喜欢这签名，孤独是一个人的狂欢
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10楼2013-09-29 15:36:54
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