应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 溶菌酶制备及如何破碎细菌细胞壁
61/1返回列表
查看: 3726  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fannyzehong

银虫 (初入文坛)

[求助] 溶菌酶制备及如何破碎细菌细胞壁

老师要我用溶菌酶破碎细胞壁，显微观察无细胞壁的细菌内部结构等等。请教下，这样的溶菌酶怎么配制？浓度？破碎细胞壁的步骤？越详细越好，谢谢了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-28 08:08:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
没做过，不知道跟革兰氏阳性菌提取基因的第一步是不是一样的
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
2楼2012-02-28 11:11:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fannyzehong

银虫 (初入文坛)
我从没涉及到这个领域，以前是做组培的。就是想问问溶菌酶是怎么配制的？有人说用水或PBS缓冲液或Tris-HCl。有冰浴也有37°温浴。所以我很糊涂，不知道怎么办。我的目的很简单，就是要把细菌细胞壁破碎了就好。急啊，请大家帮帮我。不甚感激
赞一下 回复此楼
3楼2012-02-28 14:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fannyzehong at 2012-02-28 14:49:33:
我从没涉及到这个领域，以前是做组培的。就是想问问溶菌酶是怎么配制的？有人说用水或PBS缓冲液或Tris-HCl。有冰浴也有37°温浴。所以我很糊涂，不知道怎么办。我的目的很简单，就是要把细菌细胞壁破碎了就好。急 ...

溶菌酶用水或PBS缓冲液或Tris-HCl都可以啊，我一般用灭菌水，懒得配制缓冲液
水浴37°C半小时
不知道行不行···还望楼主做出了了分享一下啊
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
4楼2012-02-29 09:46:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongqifei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fannyzehong: 金币+5 2012-03-31 11:02:54
fannyzehong: 金币+5 2012-03-31 11:04:35
我用溶菌酶做过大肠杆菌破壁（用于纯化蛋白）。当时用的浓度是4mg/mL，buffer是50mM Tris-HCl（pH 8.0），50mM Glucose，1mM EDTA，室温放置15分钟。
你想制备原生质体，可能buffer的渗透压要注意点，去壁的时候可以隔一段时间取一点来镜检。
赞一下 回复此楼
何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
5楼2012-02-29 10:29:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hongqifei at 2012-02-29 10:29:43
我用溶菌酶做过大肠杆菌破壁（用于纯化蛋白）。当时用的浓度是4mg/mL，buffer是50mM Tris-HCl（pH 8.0），50mM Glucose，1mM EDTA，室温放置15分钟。
你想制备原生质体，可能buffer的渗透压要注意点，去壁的时候可 ...

请问下，4mg/mL是配制的浓度？还是作用的终浓度？
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-30 15:56:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fannyzehong 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +9 rare12345 2026-03-18 9/450 2026-03-19 09:46 by 30660438
[基金申请] 国自科面上基金字体 +7 iwuli 2026-03-12 8/400 2026-03-19 08:55 by sjtu2012
[考研] 0703化学调剂 +8 妮妮ninicgb 2026-03-15 12/600 2026-03-19 05:55 by anny19840123
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +10 秋有木北 2026-03-14 10/500 2026-03-19 05:52 by anny19840123
[考研] 一志愿天大材料与化工（085600）总分338 +4 蔡大美女 2026-03-13 4/200 2026-03-18 22:47 by walc
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +4 材化逐梦人 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:22 by 007_lilei
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿，福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨； 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭