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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 求蓝藻(蓝细菌)的细胞壁破碎方法

如题,想知道不丧失细胞形态的蓝藻破壁方法。

我查了一些文献,也相应的做了实验,比如溶菌酶处理,碱性裂解液裂解等方式处理蓝藻细胞。这些方法的破壁效果不明显。我看提取植物DNA有人用液氮研磨破壁后提取,但我担心液氮研磨之后细胞形态丧失。

另外,有些比较老的文献中提到蓝藻细胞壁有纤维素,果胶质,肽聚糖等成分,但没有针对特定种的描述。不知有谁有好文献或书推荐?反正至今没搜到专门研究蓝藻细胞壁的文章。

不知道现在有不破坏细胞形态的破壁新方法没?请各位虫友指教!谢谢。
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fangkaiacer

金虫 (正式写手)

门外汉,关注。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
你知道5月5日吗?
2楼2012-02-11 19:18:30
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lsbaby

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
xiao7270(金币+2): 有帮助 2012-02-14 09:30:54
理论上 应该按照植物破壁的方法来处理
纤维素酶 加果胶酶
具体参照 植物原生质体提取的方法
楼主好运
3楼2012-02-13 15:26:41
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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lsbaby at 2012-02-13 15:26:41:
理论上 应该按照植物破壁的方法来处理
纤维素酶 加果胶酶
具体参照 植物原生质体提取的方法
楼主好运

这两天查了一些基本的蓝细菌细胞壁的资料,有说蓝细菌细胞壁与植物细胞壁一致;另一说,说蓝细菌属原核生物,细胞壁与原核细胞细胞壁一致,主要是肽聚糖、脂蛋白等;还有一说,外层为脂蛋白层,内层为肽聚糖层,两层之间为周质空间,含有脂多糖和降解酶。
目前认为第三种说法比较靠谱,所以可以根据第三种说法先设定裂解条件试试。
4楼2012-02-14 09:36:25
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiao7270 at 2012-02-14 09:36:25:
这两天查了一些基本的蓝细菌细胞壁的资料,有说蓝细菌细胞壁与植物细胞壁一致;另一说,说蓝细菌属原核生物,细胞壁与原核细胞细胞壁一致,主要是肽聚糖、脂蛋白等;还有一说,外层为脂蛋白层,内层为肽聚糖层, ...

超声波??
5楼2012-02-24 21:56:59
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quiller2000

木虫 (著名写手)

你是不是要做FISH?

这个确实还是比较难的!不过我们这儿试过,不过不知道结果怎么样!
致良知
6楼2012-02-24 23:33:05
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

引用回帖:
3楼: Originally posted by lsbaby at 2012-02-13 15:26:41:
理论上 应该按照植物破壁的方法来处理
纤维素酶 加果胶酶
具体参照 植物原生质体提取的方法
楼主好运

简直是胡说八道啊,蓝藻是细菌,胞外细胞壁是肽聚糖,要是加酶也该加肽聚糖酶啊,你到底懂不懂啊,还理论上。。。。。我勒个去。。。。
7楼2012-02-27 20:06:56
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yikesong

捐助贵宾 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaoyu1014126 at 2012-02-24 21:56:59:
超声波??

听说超声波可以啊
8楼2012-04-13 19:45:29
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zx6291

铜虫 (小有名气)

用超声波吧,以前做过,可行
9楼2012-04-16 10:21:55
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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)

各位,各位,超声波在提蛋白里常用,按要提DNA。
10楼2012-04-16 11:11:25
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