应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 溶菌酶制备及如何破碎细菌细胞壁
51/1返回列表
查看: 3555  |  回复: 5
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

fannyzehong

银虫 (初入文坛)

[求助] 溶菌酶制备及如何破碎细菌细胞壁

老师要我用溶菌酶破碎细胞壁，显微观察无细胞壁的细菌内部结构等等。请教下，这样的溶菌酶怎么配制？浓度？破碎细胞壁的步骤？越详细越好，谢谢了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-02-28 08:08:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fannyzehong

银虫 (初入文坛)
我从没涉及到这个领域，以前是做组培的。就是想问问溶菌酶是怎么配制的？有人说用水或PBS缓冲液或Tris-HCl。有冰浴也有37°温浴。所以我很糊涂，不知道怎么办。我的目的很简单，就是要把细菌细胞壁破碎了就好。急啊，请大家帮帮我。不甚感激
赞一下 回复此楼
3楼2012-02-28 14:49:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

j2

木虫 (正式写手)
没做过，不知道跟革兰氏阳性菌提取基因的第一步是不是一样的
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
2楼2012-02-28 11:11:04
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fannyzehong at 2012-02-28 14:49:33:
我从没涉及到这个领域，以前是做组培的。就是想问问溶菌酶是怎么配制的？有人说用水或PBS缓冲液或Tris-HCl。有冰浴也有37°温浴。所以我很糊涂，不知道怎么办。我的目的很简单，就是要把细菌细胞壁破碎了就好。急 ...

溶菌酶用水或PBS缓冲液或Tris-HCl都可以啊，我一般用灭菌水，懒得配制缓冲液
水浴37°C半小时
不知道行不行···还望楼主做出了了分享一下啊
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
4楼2012-02-29 09:46:36
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongqifei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fannyzehong: 金币+5 2012-03-31 11:02:54
fannyzehong: 金币+5 2012-03-31 11:04:35
我用溶菌酶做过大肠杆菌破壁（用于纯化蛋白）。当时用的浓度是4mg/mL，buffer是50mM Tris-HCl（pH 8.0），50mM Glucose，1mM EDTA，室温放置15分钟。
你想制备原生质体，可能buffer的渗透压要注意点，去壁的时候可以隔一段时间取一点来镜检。
赞一下 回复此楼
何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
5楼2012-02-29 10:29:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭