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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何制备粗酶液啊？
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Alsion6

铜虫 (小有名气)

[求助] 如何制备粗酶液啊？

如何制备粗酶液，粗酶液的成分有哪些？都有和作用啊？
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1楼 2012-10-28 09:34:57
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看天

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
搜集样品 超声破碎或者加溶菌酶 然后离心取上清就是粗酶液
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
2楼2012-10-28 13:57:23
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biology-boy

禁虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
看天: 金币+2, 鼓励 常来 2012-10-28 15:55:56
本帖内容被屏蔽
3楼2012-10-28 15:18:07
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不赞同楼上的说法，好多酶并不是分泌表达的，存在于细胞内。多数的菌体要培养后，超声或者高压等物理化学方法破碎后告诉离心机离心（一般12000g、20min）后的上清才是粗酶液。
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4楼2012-10-28 16:04:23
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Alsion6

铜虫 (小有名气)
抱歉，我可能没说清楚。我是从水果中测蔗糖酶等不止一种酶的活性，看到文献中说在研磨前需加入粗酶提取液，但不知道这个粗酶提取液都有什么成分
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5楼2012-10-28 19:24:57
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分子菜鸟

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
文献没说粗酶提取液的成分吗？应该就是一些缓冲液加上些表面活性剂。
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6楼2012-10-29 17:04:20
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Alsion6

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 分子菜鸟 at 2012-10-29 17:04:20
文献没说粗酶提取液的成分吗？应该就是一些缓冲液加上些表面活性剂。

对对对，就是缓冲液，有加Tris-HCl的，也有加Triton-X100的，不知道这两个有什么区别
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7楼2012-10-30 14:10:31
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分子菜鸟

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by Alsion6 at 2012-10-30 14:10:31
对对对，就是缓冲液，有加Tris-HCl的，也有加Triton-X100的，不知道这两个有什么区别...

Tris-HCl是缓冲液，提供一定的缓冲能力和离子强度。按文献的浓度配就行。Triton-X 100是一种表面活性剂，裂解细胞膜用的，也可以用其他的表面活性剂代替。这个不一定要按文献中的配方，可以在文献配方的基础上稍加改进。
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Alsion6
8楼2012-10-30 17:09:25
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Alsion6

铜虫 (小有名气)
★ ★
送鲜花一朵
wizardfan: 金币+2, 觉得有帮助，请给金币奖励 2012-11-01 08:13:53
引用回帖:
8楼: Originally posted by 分子菜鸟 at 2012-10-30 17:09:25
Tris-HCl是缓冲液，提供一定的缓冲能力和离子强度。按文献的浓度配就行。Triton-X 100是一种表面活性剂，裂解细胞膜用的，也可以用其他的表面活性剂代替。这个不一定要按文献中的配方，可以在文献配方的基础上稍加 ...

非常感谢
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9楼2012-10-31 20:48:00
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