[求助] 如何制备粗酶液啊？

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1楼2012-10-28 09:34:57

看天

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【答案】应助回帖

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搜集样品超声破碎或者加溶菌酶然后离心取上清就是粗酶液

戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。

2楼2012-10-28 13:57:23

biology-boy

禁虫 (正式写手)

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3楼2012-10-28 15:18:07

joan198108

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【答案】应助回帖

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不赞同楼上的说法，好多酶并不是分泌表达的，存在于细胞内。多数的菌体要培养后，超声或者高压等物理化学方法破碎后告诉离心机离心（一般12000g、20min）后的上清才是粗酶液。

4楼2012-10-28 16:04:23

Alsion6

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抱歉，我可能没说清楚。我是从水果中测蔗糖酶等不止一种酶的活性，看到文献中说在研磨前需加入粗酶提取液，但不知道这个粗酶提取液都有什么成分

5楼2012-10-28 19:24:57

分子菜鸟

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文献没说粗酶提取液的成分吗？应该就是一些缓冲液加上些表面活性剂。

6楼2012-10-29 17:04:20

Alsion6

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6楼: Originally posted by 分子菜鸟 at 2012-10-29 17:04:20
文献没说粗酶提取液的成分吗？应该就是一些缓冲液加上些表面活性剂。

对对对，就是缓冲液，有加Tris-HCl的，也有加Triton-X100的，不知道这两个有什么区别

7楼2012-10-30 14:10:31

分子菜鸟

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7楼: Originally posted by Alsion6 at 2012-10-30 14:10:31
对对对，就是缓冲液，有加Tris-HCl的，也有加Triton-X100的，不知道这两个有什么区别...

Tris-HCl是缓冲液，提供一定的缓冲能力和离子强度。按文献的浓度配就行。Triton-X 100是一种表面活性剂，裂解细胞膜用的，也可以用其他的表面活性剂代替。这个不一定要按文献中的配方，可以在文献配方的基础上稍加改进。

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Alsion6

8楼2012-10-30 17:09:25

Alsion6

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 分子菜鸟 at 2012-10-30 17:09:25
Tris-HCl是缓冲液，提供一定的缓冲能力和离子强度。按文献的浓度配就行。Triton-X 100是一种表面活性剂，裂解细胞膜用的，也可以用其他的表面活性剂代替。这个不一定要按文献中的配方，可以在文献配方的基础上稍加 ...

非常感谢

9楼2012-10-31 20:48:00