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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】粗酶液的保存与纯化
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炒饭大王

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】粗酶液的保存与纯化 已有4人参与

1。酵母破碎液经离心后，4度保存酶活大概只能维持4天，破碎两天后即缓慢出现沉淀。第五天酶活基本丧失殆尽，请问如何保存，是否与缓冲液有关，我用的是100mM KPS缓冲液。
2。破碎、离心、盐析后，沉淀难以复溶，加大缓冲液的量并震荡，效果不佳，缓冲液还是100mM KPS缓冲液，请问如何复溶？
3。透析后，接下来的步骤没有确定下来，希望暂时能保存下透析后的酶液，有两个想法，一，将酶液分批以-4度冷冻，二，将酶液冷冻干燥后保存，请问哪个更可行些，如果有其他方法，也请指点一二。
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1楼 2010-08-23 14:18:31
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cduzl

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎交流！ 2010-08-23 21:01:50
保存我们一般是把提取的酶液用低温冷却循环将其旋起来，然后放在-80度冰箱中保存，这样保存的时间很长。纯化我们是直接上葡聚糖凝胶柱，分出来的样品再上阳离子交换柱
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2楼2010-08-23 14:57:16
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njhncn

铁杆木虫 (正式写手)
★
amisking(金币+1):鼓励交流 2010-08-23 21:01:57
可根据所分离的目标酶的保存温度要求进行，因为不同的酶对温度的要求不同。当然低温是万能的保存方法
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3楼2010-08-23 17:20:34
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炒饭大王

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cduzl at 2010-08-23 14:57:16:
保存我们一般是把提取的酶液用低温冷却循环将其旋起来，然后放在-80度冰箱中保存，这样保存的时间很长。纯化我们是直接上葡聚糖凝胶柱，分出来的样品再上阳离子交换柱

低温冷却循环旋起来是什么意思
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4楼2010-08-24 09:34:10
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1987lily1987

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
酶液应在-5~-20℃下冻存，量大的话建议浓缩冻干，若制成酶粉的话可在4℃下保藏
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5楼2010-10-19 15:56:46
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