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炒饭大王

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】粗酶液的保存与纯化 已有4人参与

1。酵母破碎液经离心后,4度保存酶活大概只能维持4天,破碎两天后即缓慢出现沉淀。第五天酶活基本丧失殆尽,请问如何保存,是否与缓冲液有关,我用的是100mM KPS缓冲液。
2。破碎、离心、盐析后,沉淀难以复溶,加大缓冲液的量并震荡,效果不佳,缓冲液还是100mM KPS缓冲液,请问如何复溶?
3。透析后,接下来的步骤没有确定下来,希望暂时能保存下透析后的酶液,有两个想法,一,将酶液分批以-4度冷冻,二,将酶液冷冻干燥后保存,请问哪个更可行些,如果有其他方法,也请指点一二。
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cduzl

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎交流! 2010-08-23 21:01:50
保存我们一般是把提取的酶液用低温冷却循环将其旋起来,然后放在-80度冰箱中保存,这样保存的时间很长。纯化我们是直接上葡聚糖凝胶柱,分出来的样品再上阳离子交换柱
2楼2010-08-23 14:57:16
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njhncn

铁杆木虫 (正式写手)


amisking(金币+1):鼓励交流 2010-08-23 21:01:57
可根据所分离的目标酶的保存温度要求进行,因为不同的酶对温度的要求不同。当然低温是万能的保存方法
3楼2010-08-23 17:20:34
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炒饭大王

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by cduzl at 2010-08-23 14:57:16:
保存我们一般是把提取的酶液用低温冷却循环将其旋起来,然后放在-80度冰箱中保存,这样保存的时间很长。纯化我们是直接上葡聚糖凝胶柱,分出来的样品再上阳离子交换柱

低温冷却循环旋起来是什么意思
4楼2010-08-24 09:34:10
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1987lily1987

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶液应在-5~-20℃下冻存,量大的话建议浓缩冻干,若制成酶粉的话可在4℃下保藏
5楼2010-10-19 15:56:46
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