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老地方

金虫 (正式写手)

[交流] Tris-HCl和PBS缓冲液的区别和用途 已有5人参与

大家测蛋白酶活一般都是用的什么缓冲液啊?Tris-HCl还是PBS,但是感觉用Tris-HCl用的比较多。大家能说说这两种缓冲液的区别和用途么?
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攀科学高峰
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-09 09:28:03
两种体系都很常用。PBS主要是离子强度高一些。PBS更便宜,很多酶在磷酸缓冲液中的活性很好,但是有些反应对离子敏感。或者有些反应需要一定浓度的钙离子不适合用磷酸缓冲液。
2楼2012-12-09 02:25:09
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松开

铜虫 (初入文坛)

★
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这两种缓冲液的pH值范围不同,PBS中性,Tris-Hcl为碱性,一般的缓冲液都是这样用的,对不对?
3楼2012-12-09 13:50:22
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老地方

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 松开 at 2012-12-09 13:50:22
这两种缓冲液的pH值范围不同,PBS中性,Tris-Hcl为碱性,一般的缓冲液都是这样用的,对不对?

我不认同你的观点,我的蛋白在PBS缓冲液中酶活性,但是在Tris缓冲液中有活性。
攀科学高峰
4楼2012-12-09 14:13:01
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松开

铜虫 (初入文坛)

★
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为什么不同的缓冲体系中的酶活不同呢?不是一般在离子存在的条件下酶活会高吗/?学习中,
5楼2012-12-10 12:55:19
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gelois

金虫 (正式写手)

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zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-26 22:09:25
两种缓冲液虽然都很常用,但是本质上还是有些区别的。

PBS:溶液的PKa值会随着缓冲液的稀释而变化,而且抑制多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等。
Tris:受缓冲液的浓度和使用温度的影响。可以参与多种酶反应。
6楼2012-12-10 13:16:29
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fyyzr

木虫 (小有名气)

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引用回帖:
6楼: Originally posted by gelois at 2012-12-10 13:16:29
两种缓冲液虽然都很常用,但是本质上还是有些区别的。

PBS:溶液的PKa值会随着缓冲液的稀释而变化,而且抑制多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等。
Tris:受缓冲液的浓度和使用温度的影响。可以参与多种 ...

你好,那请问一下呢,就是我测定的一个酶活,在酶粗提取液这里有点问题!有2篇文章中用的0.1M的Tris-Hcl溶液PH7.8,而另外2篇文章中却用的0.1mM的PBS溶液PH6.25,第一个就是浓度差距在1000了,第二就是PH也不同~!我就搞不明白了~谢谢!
7楼2013-01-26 21:12:04
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8楼2021-01-05 11:24:36
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