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065316

金虫 (小有名气)

[求助] PBS缓冲液配制问题

本人菜鸟，询问有关PB、PBS缓冲液的区别？另外就是PBS缓冲液中，什么时候加NaCl、KCl，网上好多配方哦，都搞糊涂了。各位兄弟姐妹，求助啊！
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PBS缓冲溶液配制

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1楼2012-11-20 15:08:15
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990431231

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-11-20 17:20:22
065316: 金币+3, ★有帮助 2012-11-22 08:52:03
PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液，
0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等，其pH应在7.25～7.35之间，否则需要调整。
0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。
一般情况下，0.2mol/l PB的pH值稍高些，稀释成0.01mol/L的PBS时，常可达到要求的pH值，若需调整pH，通常也是调PB的pH。

配制方法为：
1．0.2mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）
　　试剂： NaH2PO4•2H2O
　　Na2HPO4•12H2O
　　配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
　　（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2o 31.2g(或 NaH2PO4•H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
　　（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4.•12H2o 71.632g（或 Na2HPO4•7H2O 53.6g或 Na2HPO4•2H2o 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
　　 （3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4•12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。

　　2．0.01mol/L磷酸盐缓冲生理盐水（Phosphate Buffered Saline, PBS）
　　试剂：0.2mol/L PB　　　50ml
　　NaCl 　　　　　　　　　8.5～9g(约0.15mol/L)
　　重蒸水 　　　　　　　　至1000ml
　　配制方法：称取NaCl 8.5～9g及0.2mol/L的PB 50ml，加入1000ml的容量瓶中，最后加重蒸水至1000ml，充分摇匀即可。若拟配制0.02mol/L的PBS，则PB量加倍即可，依此类推
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2楼2012-11-20 15:12:19
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areylulu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-20 17:20:31
065316: 金币+7, ★★★很有帮助 2012-11-22 08:51:50
PB是磷酸盐缓冲液，PBS是磷酸盐缓冲生理盐水。PB就是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠按一定比例混合成的磷酸缓冲液，PBS在PB的基础上还加入NaCl
至于什么时候加我就不知道了。我们实验室一直做的是PB缓冲液
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3楼2012-11-20 15:17:02
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065316

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by areylulu at 2012-11-20 15:17:02
PB是磷酸盐缓冲液，PBS是磷酸盐缓冲生理盐水。PB就是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠按一定比例混合成的磷酸缓冲液，PBS在PB的基础上还加入NaCl
至于什么时候加我就不知道了。我们实验室一直做的是PB缓冲液

我做的测酶活，不知是否要加？
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4楼2012-11-20 15:18:36
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065316

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 990431231 at 2012-11-20 15:12:19
PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液，
0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等，其pH应在7.25～7.35之间，否则需要调整。
0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。
一般情况下，0.2mol/l PB的 ...

我做的测酶活，不知是否要加？
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5楼2012-11-20 15:18:44
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areylulu

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by areylulu at 2012-11-20 15:17:02
PB是磷酸盐缓冲液，PBS是磷酸盐缓冲生理盐水。PB就是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠按一定比例混合成的磷酸缓冲液，PBS在PB的基础上还加入NaCl
至于什么时候加我就不知道了。我们实验室一直做的是PB缓冲液

不好意思。刚看错了。我们实验室是先将磷酸二氢钠和磷酸氢二钠按一定比例混合后做成1L的量，然后再和做好的1L的nacl溶液一起混合。然后测PH即可。
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6楼2012-11-20 15:21:04
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zyy880326

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 990431231 at 2012-11-20 15:12:19
PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液，
0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等，其pH应在7.25～7.35之间，否则需要调整。
0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。
一般情况下，0.2mol/l PB的 ...

请教你一个问题：文献中phosphate-buffered saline 可以缩写为PBS，phosphate buffer solution也可以缩写为PBS，请问他们两个一样吗，是一样的配置方法吗。我知道的PBS（PH=7.4   1000ml）配方为11.65g Na2HPO4， 1.65gKH2PO4，9gNaCl；溶解后用0.1M氢氧化钠或盐酸调PH值到7.4。 另外一种配方为：取磷酸二氢钾1.36g， 加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。这两种配方，那种正确。我就想配一种PH=7.4的缓冲溶液，做反应用。还有比如0.1M phosphate buffer solution of PH 7.4  这种缓冲溶液怎么配，0.1M 指什么，怎么确定。多谢了
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Tostrive,toseek,tofindandnottoyield.
7楼2013-08-19 09:13:41
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陈莹

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zyy880326 at 2013-08-19 09:13:41
请教你一个问题：文献中phosphate-buffered saline 可以缩写为PBS，phosphate buffer solution也可以缩写为PBS，请问他们两个一样吗，是一样的配置方法吗。我知道的PBS（PH=7.4   1000ml）配方为11.65g Na2HPO4，  ...

我也想请教这个问题，不知你现在是否清楚答案，能否指教一下啊？
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云淡风轻
8楼2014-11-11 11:16:40
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z631535213

木虫 (正式写手)
学习下  LZ  你这个问题解决没啊   有结果告诉下呗
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9楼2015-06-12 17:55:22
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