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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » TBE缓冲液配制
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chemswu

金虫 (初入文坛)

[求助] TBE缓冲液配制

请教：TBE缓冲液配制 ？
Tris-硼酸（TBE）
使用液
0.5X：0.045mol/L Tris-硼酸
      0.001mol/L EDTA
储存液
5X：54g Tris碱
    27.5g硼酸
    20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

1、使用液按照上述配方配制成多少体积？用什么作溶剂？
2、0.5X、5X是什么代号？
3、EDTA是用二钠盐吗？
4、pH=8.0是用什么调节（用NaOH吗？）
5、TBE缓冲液能储存多久？（我这是做DNA琼脂糖凝胶电泳）
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1楼 2011-05-17 16:30:57
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cxyoyoma

禁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1949stone(EPI+1): 是的 2011-05-17 18:27:01
1.500ml,1000ml都可以啊，自己算下称多少就行
2.5X的储存液稀释10倍就可以
3.我是用二钠盐配的
4.要用HCl调的
5.应该很久吧，我是放4度的
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2楼2011-05-17 17:14:54
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 欢迎纠错 2011-05-17 18:27:25
chemswu(金币+5): 谢谢！我这是碱性，用NaOH调节合适 2011-05-18 08:25:58
楼上回答的除了4以外都没问题， 20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）是用NaOH调节的，EDTA是酸性的。
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3楼2011-05-17 18:01:12
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普通回帖

cxyoyoma

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
4楼2011-05-17 18:12:38
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chemswu

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by chemswu at 2011-05-17 16:30:57:
请教：TBE缓冲液配制 ？
Tris-硼酸（TBE）
使用液
0.5X：0.045mol/L Tris-硼酸
      0.001mol/L EDTA
储存液
5X：54g Tris碱
    27.5g硼酸
    20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

1、使用液按照上述配方配 ...

感谢！回复很详细。
500ml,1000ml都可以啊，自己算下称多少就行，只是“5X：54g Tris碱
    27.5g硼酸”给的是质量，没说浓度，那我参考0.5X就可以了。
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5楼2011-05-18 08:34:48
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chemswu

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by cxyoyoma at 2011-05-17 18:12:38:
哦，配样的缓冲液调pH是用酸，TBE我们没调pH的...

嗨！感谢帮助，本人搜索到详细的相关信息：
三、常用的电泳缓冲液
缓冲液        使用液        浓贮存液（每升）
Tris-乙酸（TAE）        1×：0.04mol/L Tris-乙酸        50×：242g Tris碱
　        0.001mol/L EDTA        57.1ml冰乙酸
　        　        100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
Tris-磷酸（TPE）        1×:0.09mol/L Tris-磷酸        10×:10g Tris碱
　        0.002mol/L EDTA        15.5ml85%磷酸（1.679g/ml）
　        　        40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
Tris-硼酸（TBE）a        0.5×：0.045mol/L Tris-硼酸        5×：54g Tris碱
　        0.001mol/L EDTA        27.5硼酸
　        　        20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
碱性缓冲液b        1×:50mmol/L NaOH        1×:5ml 10mol/L NaOH
　        1mmol/L EDTA        2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)
Tris-甘氨酸c        1×:25mmol/L Tris        5×:15.1g Tris
　        250mmol/L 甘氨酸        94g 苷氨酸（电泳级）（pH8.3）
　        0.1% SDS        50ml 10% SDS(电泳级)
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6楼2011-05-18 14:00:01
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Assassinate

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

DNA琼脂糖凝胶电泳不是用TAE缓冲液吗？
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7楼2012-07-23 12:44:52
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dajin

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-05-17 18:01:12
楼上回答的除了4以外都没问题， 20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）是用NaOH调节的，EDTA是酸性的。

请教一下：直接称量EDTA配制缓冲液可以吗？然后最后再调缓冲液的pH。还是用0.5mol/L EDTA（pH8.0）后就不用调缓冲液的pH了。谢谢
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在压力中能享受生活吗
8楼2013-04-19 15:39:20
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liyunyu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by dajin at 2013-04-19 15:39:20
请教一下：直接称量EDTA配制缓冲液可以吗？然后最后再调缓冲液的pH。还是用0.5mol/L EDTA（pH8.0）后就不用调缓冲液的pH了。谢谢...

请问这个TBE到底是在EDTA那里调PH为8还是在后面缓冲液调为8，如果是EDTA调是不是后面的TBE就不用再调PH了，谢谢！
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9楼2013-10-07 21:10:41
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走过三月

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

0.5X就是5X的稀释十倍，一般实验室配置5X的，用的时候就取一些稀释10倍
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10楼2013-10-08 09:10:37
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