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chemswu

金虫 (初入文坛)

[求助] TBE缓冲液配制

请教:TBE缓冲液配制 ?
Tris-硼酸(TBE)
使用液
0.5X:0.045mol/L Tris-硼酸
      0.001mol/L EDTA
储存液
5X:54g Tris碱
    27.5g硼酸
    20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

1、使用液按照上述配方配制成多少体积?用什么作溶剂?
2、0.5X、5X是什么代号?
3、EDTA是用二钠盐吗?
4、pH=8.0是用什么调节(用NaOH吗?)
5、TBE缓冲液能储存多久?(我这是做DNA琼脂糖凝胶电泳)
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cxyoyoma

禁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1949stone(EPI+1): 是的 2011-05-17 18:27:01
1.500ml,1000ml都可以啊,自己算下称多少就行
2.5X的储存液稀释10倍就可以
3.我是用二钠盐配的
4.要用HCl调的
5.应该很久吧,我是放4度的
2楼2011-05-17 17:14:54
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 欢迎纠错 2011-05-17 18:27:25
chemswu(金币+5): 谢谢!我这是碱性,用NaOH调节合适 2011-05-18 08:25:58
楼上回答的除了4以外都没问题, 20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)是用NaOH调节的,EDTA是酸性的。
3楼2011-05-17 18:01:12
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普通回帖

cxyoyoma

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

4楼2011-05-17 18:12:38
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chemswu

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by chemswu at 2011-05-17 16:30:57:
请教:TBE缓冲液配制 ?
Tris-硼酸(TBE)
使用液
0.5X:0.045mol/L Tris-硼酸
      0.001mol/L EDTA
储存液
5X:54g Tris碱
    27.5g硼酸
    20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

1、使用液按照上述配方配 ...

感谢!回复很详细。
500ml,1000ml都可以啊,自己算下称多少就行,只是“5X:54g Tris碱
    27.5g硼酸”给的是质量,没说浓度,那我参考0.5X就可以了。
5楼2011-05-18 08:34:48
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chemswu

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by cxyoyoma at 2011-05-17 18:12:38:
哦,配样的缓冲液调pH是用酸,TBE我们没调pH的...

嗨!感谢帮助,本人搜索到详细的相关信息:
三、常用的电泳缓冲液
缓冲液        使用液        浓贮存液(每升)
Tris-乙酸(TAE)        1×:0.04mol/L Tris-乙酸        50×:242g Tris碱
         0.001mol/L EDTA        57.1ml冰乙酸
                  100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
Tris-磷酸(TPE)        1×:0.09mol/L Tris-磷酸        10×:10g Tris碱
         0.002mol/L EDTA        15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)
                  40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
Tris-硼酸(TBE)a        0.5×:0.045mol/L Tris-硼酸        5×:54g Tris碱
         0.001mol/L EDTA        27.5硼酸
                  20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
碱性缓冲液b        1×:50mmol/L NaOH        1×:5ml 10mol/L NaOH
         1mmol/L EDTA        2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)
Tris-甘氨酸c        1×:25mmol/L Tris        5×:15.1g Tris
         250mmol/L 甘氨酸        94g 苷氨酸(电泳级)(pH8.3)
         0.1% SDS        50ml 10% SDS(电泳级)
6楼2011-05-18 14:00:01
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Assassinate

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

DNA琼脂糖凝胶电泳不是用TAE缓冲液吗?
7楼2012-07-23 12:44:52
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dajin

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-05-17 18:01:12
楼上回答的除了4以外都没问题, 20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)是用NaOH调节的,EDTA是酸性的。

请教一下:直接称量EDTA配制缓冲液可以吗?然后最后再调缓冲液的pH。还是用0.5mol/L EDTA(pH8.0)后就不用调缓冲液的pH了。谢谢
在压力中能享受生活吗
8楼2013-04-19 15:39:20
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liyunyu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by dajin at 2013-04-19 15:39:20
请教一下:直接称量EDTA配制缓冲液可以吗?然后最后再调缓冲液的pH。还是用0.5mol/L EDTA(pH8.0)后就不用调缓冲液的pH了。谢谢...

请问这个TBE到底是在EDTA那里调PH为8还是在后面缓冲液调为8,如果是EDTA调是不是后面的TBE就不用再调PH了,谢谢!
9楼2013-10-07 21:10:41
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走过三月

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

0.5X就是5X的稀释十倍,一般实验室配置5X的,用的时候就取一些稀释10倍
10楼2013-10-08 09:10:37
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