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Jac27

银虫 (小有名气)

[求助] HEPES缓冲液怎么配置？

最近要用HEPES做紫外实验，文献中说(20 mM HEPES, pH 7.4, 150 mM NaCl) ，不太明白这个是什么意思，是配到7.4再加NaCl呢，还是加NaCl后再调到7.4？还有为啥要加盐啊？pH7.4的HEPES怎么配置呢？
比较外行，求高人指教~
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要快乐，要开朗，要坚韧，要温暖。要原谅这个世界和自己。要告诉自己，我值得拥有最好的一切。
1楼 2012-04-16 10:56:27
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
telomerase: 金币+2, 保持总体积50~70%，这个很重要 2012-04-16 11:35:20
Jac27: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-04-23 15:34:24
溶解HEPES，氯化钠，溶解（保持总体积50~70%），加酸条件pH=7.4，定溶混匀就好了
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2楼2012-04-16 11:10:35
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YZQ_XM

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Jac27: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-04-23 15:35:10
配制方法如2楼，加盐是为了提供盐离子，缓冲液嘛。
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3楼2012-04-16 11:28:51
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Jac27

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chaijudi at 2012-04-16 11:10:35:
溶解HEPES，氯化钠，溶解（保持总体积50~70%），加酸条件pH=7.4，定溶混匀就好了

保持总体积50%-70% 是说先用这么多水溶解吗？
加酸调碱？这个东西是弱酸性的吧？
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要快乐，要开朗，要坚韧，要温暖。要原谅这个世界和自己。要告诉自己，我值得拥有最好的一切。
4楼2012-04-16 12:51:03
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youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先按照浓度把HEPES和NaCl称号溶解，再调pH，然后在再定容
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天才就怕不够天才，坏又不够坏，天天都想离开，却不知何处才能换骨脱胎
5楼2012-04-16 15:50:39
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微微右旋

金虫 (正式写手)
2楼正解。配的时候动作快点。弄好了就封好口。按照经验hepes在空气中暴露的时间长了pH会发生改变。
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6楼2012-04-16 21:31:28
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人理解是先将HEPES调制pH 7.4，然后向溶液中加入终浓度为150mM的NaCl（也可加入固体NaCl）
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7楼2012-04-17 10:13:07
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