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Jac27

银虫 (小有名气)

[求助] HEPES缓冲液怎么配置?

最近要用HEPES做紫外实验,文献中说(20 mM HEPES, pH 7.4, 150 mM NaCl) ,不太明白这个是什么意思,是配到7.4再加NaCl呢,还是加NaCl后再调到7.4?还有为啥要加盐啊?pH7.4的HEPES怎么配置呢?
比较外行,求高人指教~
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要快乐,要开朗,要坚韧,要温暖。要原谅这个世界和自己。要告诉自己,我值得拥有最好的一切。
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
telomerase: 金币+2, 保持总体积50~70%,这个很重要 2012-04-16 11:35:20
Jac27: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-04-23 15:34:24
溶解HEPES,氯化钠,溶解(保持总体积50~70%),加酸条件pH=7.4,定溶混匀就好了
2楼2012-04-16 11:10:35
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YZQ_XM

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Jac27: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-04-23 15:35:10
配制方法如2楼,加盐是为了提供盐离子,缓冲液嘛。
3楼2012-04-16 11:28:51
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Jac27

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chaijudi at 2012-04-16 11:10:35:
溶解HEPES,氯化钠,溶解(保持总体积50~70%),加酸条件pH=7.4,定溶混匀就好了

保持总体积50%-70% 是说先用这么多水溶解吗?
加酸调碱?这个东西是弱酸性的吧?
要快乐,要开朗,要坚韧,要温暖。要原谅这个世界和自己。要告诉自己,我值得拥有最好的一切。
4楼2012-04-16 12:51:03
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youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先按照浓度把HEPES和NaCl称号溶解,再调pH,然后在再定容
天才就怕不够天才,坏又不够坏,天天都想离开,却不知何处才能换骨脱胎
5楼2012-04-16 15:50:39
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微微右旋

金虫 (正式写手)

2楼正解。配的时候动作快点。弄好了就封好口。按照经验hepes在空气中暴露的时间长了pH会发生改变。
6楼2012-04-16 21:31:28
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人理解是先将HEPES调制pH 7.4,然后向溶液中加入终浓度为150mM的NaCl(也可加入固体NaCl)
7楼2012-04-17 10:13:07
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