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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » HEPES缓冲液pH=6.0？
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Shoney

木虫 (著名写手)

[求助] HEPES缓冲液pH=6.0？

自己配的HEPES缓冲液，成分为NaCl(0.145mol/L)，KCl(0.0033mol/L)和HEPES(0.02mol/L)，用pH计测得其pH值居然是6.0，是不是HEPES变质了？
ps：pH计是好的
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1楼 2012-02-27 17:26:27
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Shoney(金币+1): 谢谢应助 2012-03-05 18:47:36
HEPES缓冲范围是pH6.8-8.2。当然这是在用NaOH进行酸度调节的情况下的。温度也是有影响的。
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2楼2012-03-01 10:45:25
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Shoney

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-03-01 10:45:25:
HEPES缓冲范围是pH6.8-8.2。当然这是在用NaOH进行酸度调节的情况下的。温度也是有影响的。

也就是说我的溶液没有问题，只是需要用NaOH来调节pH值？
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3楼2012-03-02 09:51:22
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Shoney at 2012-03-02 09:51:22:
也就是说我的溶液没有问题，只是需要用NaOH来调节pH值？

理论上是的。你不妨去拿一部分先用NaOH调调PH试试。
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4楼2012-03-02 10:36:05
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Shoney

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-03-02 10:36:05:
理论上是的。你不妨去拿一部分先用NaOH调调PH试试。

因为我是按照文献上的配方来配制溶液的
文献给出的配方是：Na+=0.145mol/L，K+=0.0033mol/L，HEPES=0.02mol/L
我就认为应该是NaCl=0.145mol/L，KCl=0.0033mol/L
难道这Na+还包括了一部分NaOH？如果是的话，那NaCl和NaOH的比例是多少？
如果按照你说的加NaOH调，那势必会改变Na+的浓度了
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5楼2012-03-03 10:14:34
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by Shoney at 2012-03-03 10:14:34:
因为我是按照文献上的配方来配制溶液的
文献给出的配方是：Na+=0.145mol/L，K+=0.0033mol/L，HEPES=0.02mol/L
我就认为应该是NaCl=0.145mol/L，KCl=0.0033mol/L
难道这Na+还包括了一部分NaOH？如果是的话，那 ...

你应该是用来做buffer的吧。我们的2×HEPES缓冲盐溶液的配制是
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。
我不知道你的文献中是指什么。
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6楼2012-03-05 09:08:25
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Shoney

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dshlove at 2012-03-05 09:08:25:
你应该是用来做buffer的吧。我们的2×HEPES缓冲盐溶液的配制是
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。
我不知道 ...

也是用来做buffer的
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7楼2012-03-05 09:50:15
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chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Shoney(金币+1): 谢谢应助 2012-03-05 18:47:26
HEPES buffer缓冲溶液的配制方法HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式: C8H18N2O4S。
HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。
关于HEPES 缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES＋NaOH，另一种是HEPES＋盐。各种配制方法总结如下：

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制
119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH（HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2），然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。

二、加少量盐的HEPES Buffer配方（500ml）
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值，最后定容。

三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。
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8楼2012-03-05 10:17:57
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emeraldine

新虫 (著名写手)
HEPES是酸式的（分子内有磺酸基），所以显酸性。
要用NaOH调pH
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9楼2012-07-28 11:27:32
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Shoney

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by emeraldine at 2012-07-28 11:27:32
HEPES是酸式的（分子内有磺酸基），所以显酸性。
要用NaOH调pH

我是按照文献的配方来配的，文献中也没说要用NaOH调，难道是默认的？
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10楼2012-07-29 09:16:01
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