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zhaowanying

木虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】配置HEPES 缓冲溶液时为什么要加其他的盐？

本人是学化学的最近需要配置HEPES 缓冲溶液测试一下荧光和紫外，查阅相关的文献发现都加有KCl,NaCl，Na2HPO4.7H2O等盐,想请教一下各位高手为什么要加这些盐，如何选择，量怎么加？

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1楼 2010-12-14 10:44:09

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zhaowanying

木虫 (正式写手)

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为什么没人回复呢？问题很弱吗？

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2楼2010-12-14 13:19:13

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taotao4108

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★ ★
dhd997(金币+2):good 2010-12-19 09:32:29

HEPES buffer缓冲溶液的配制方法关于HEPES 缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES＋NaOH，另一种是HEPES＋盐。各种配制方法总结如下：　　一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制　　119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH（HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2），然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。　　二、加少量盐的HEPES Buffer配方（500ml）　　HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值，最后定容。　　三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制　　将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。

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3楼2010-12-14 16:45:51

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taotao4108

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zhaowanying(金币+2): 2010-12-15 15:35:44

hepes在细胞培养中主要就起调节pH的作用，加其它盐我觉得是为了更好的发挥缓冲液的“缓冲”效果，个人见解，请酌情参考

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4楼2010-12-14 16:47:21

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zhaowanying

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引用回帖:

Originally posted by taotao4108 at 2010-12-14 16:47:21:
hepes在细胞培养中主要就起调节pH的作用，加其它盐我觉得是为了更好的发挥缓冲液的“缓冲”效果，个人见解，请酌情参考

我想加的钠，钾盐是不是为了更好的模拟细胞环境，加NAH2PO4 是为了增加缓冲能力？

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5楼2010-12-15 15:38:26

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taotao4108

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zhaowanying(金币+3): 2010-12-16 14:01:05

引用回帖:

Originally posted by zhaowanying at 2010-12-15 15:38:26:

我想加的钠，钾盐是不是为了更好的模拟细胞环境，加NAH2PO4 是为了增加缓冲能力？

你看看细胞培养最常用的磷酸盐缓冲液的配方，你就知道了。你应该还记得弱酸强碱盐，弱碱强酸盐吧，磷酸是中性酸，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠都算是弱酸强碱盐，配制的溶液都是偏碱性的，而且可以起到很好的缓冲作用，这不正满足了细胞生长需要的偏碱条件吗

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6楼2010-12-16 12:29:34

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zhaowanying

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引用回帖:

Originally posted by taotao4108 at 2010-12-16 12:29:34:

你看看细胞培养最常用的磷酸盐缓冲液的配方，你就知道了。你应该还记得弱酸强碱盐，弱碱强酸盐吧，磷酸是中性酸，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠都算是弱酸强碱盐，配制的溶液都是偏碱性的，而且可以起到很好的缓冲作 ...

恩，有道理，谢啦！

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7楼2010-12-16 14:00:47

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