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zhaowanying

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】配置HEPES 缓冲溶液时为什么要加其他的盐?

本人是学化学的最近需要配置HEPES 缓冲溶液测试一下荧光和紫外,查阅相关的文献发现都加有KCl,NaCl,Na2HPO4.7H2O等盐,想请教一下各位高手为什么要加这些盐,如何选择,量怎么加?
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zhaowanying

木虫 (正式写手)


为什么没人回复呢?问题很弱吗?
2楼2010-12-14 13:19:13
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taotao4108

金虫 (正式写手)


★ ★
dhd997(金币+2):good 2010-12-19 09:32:29
HEPES buffer缓冲溶液的配制方法关于HEPES 缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下:   一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制   119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。   二、加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml)   HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。   三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制   将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5M NaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。
3楼2010-12-14 16:45:51
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taotao4108

金虫 (正式写手)


zhaowanying(金币+2): 2010-12-15 15:35:44
hepes在细胞培养中主要就起调节pH的作用,加其它盐我觉得是为了更好的发挥缓冲液的“缓冲”效果,个人见解,请酌情参考
4楼2010-12-14 16:47:21
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zhaowanying

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by taotao4108 at 2010-12-14 16:47:21:
hepes在细胞培养中主要就起调节pH的作用,加其它盐我觉得是为了更好的发挥缓冲液的“缓冲”效果,个人见解,请酌情参考

我想加的钠,钾盐是不是为了更好的模拟细胞环境,加NAH2PO4 是为了增加缓冲能力?
5楼2010-12-15 15:38:26
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taotao4108

金虫 (正式写手)


zhaowanying(金币+3): 2010-12-16 14:01:05
引用回帖:
Originally posted by zhaowanying at 2010-12-15 15:38:26:

我想加的钠,钾盐是不是为了更好的模拟细胞环境,加NAH2PO4 是为了增加缓冲能力?

你看看细胞培养最常用的磷酸盐缓冲液的配方,你就知道了。你应该还记得弱酸强碱盐,弱碱强酸盐吧,磷酸是中性酸,磷酸二氢钠和磷酸氢二钠都算是弱酸强碱盐,配制的溶液都是偏碱性的,而且可以起到很好的缓冲作用,这不正满足了细胞生长需要的偏碱条件吗
6楼2010-12-16 12:29:34
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zhaowanying

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by taotao4108 at 2010-12-16 12:29:34:


你看看细胞培养最常用的磷酸盐缓冲液的配方,你就知道了。你应该还记得弱酸强碱盐,弱碱强酸盐吧,磷酸是中性酸,磷酸二氢钠和磷酸氢二钠都算是弱酸强碱盐,配制的溶液都是偏碱性的,而且可以起到很好的缓冲作 ...

恩,有道理,谢啦!
7楼2010-12-16 14:00:47
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Crescendo

铁杆木虫 (著名写手)


zhaowanying(金币+2): 2011-01-04 10:57:35
为了维持渗透平衡。
8楼2010-12-19 09:27:48
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Crescendo

铁杆木虫 (著名写手)


帖子真精彩!
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9楼2011-08-31 16:21:09
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staywithme

新虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
加盐也是维持一定的离子强度
10楼2011-09-15 15:05:41
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ririgay

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
加盐是为了增强缓冲能力
11楼2012-11-12 18:14:07
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