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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 0.1mol/L 的磷酸盐缓冲液（PH=7.4）如何配置？
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mier246

金虫 (小有名气)

[求助] 0.1mol/L 的磷酸盐缓冲液（PH=7.4）如何配置？

请教各位，我做实验测定酶活性，需要用到0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（PH=7.4），但不知道配方，请问各位这种缓冲液该如何配置？急用，希望大家能帮帮我，多谢多谢
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分子生化实验经验积累 实验室缓冲液配制

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1楼 2011-05-06 22:00:48
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

smiles292

铁杆木虫 (正式写手)

暂无方向

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
mier246(金币+3): 2011-05-07 15:39:24
lstt09nk(金币+5): 鼓励一下学化学做生物的~~ 2011-05-07 19:06:53
silicare(EPI+1): nacl是为了调渗透压，利于生物学活性 2011-05-09 18:08:01
不要糊涂嘛，我这做化学的还得自己搞生物呢，你这才算什么。。。。磷酸缓冲液分两种，一种只有两种磷酸盐，一种还加入氯化钠等盐，其实测活性这种东西，没有必要那么精细，楼主要是做生物的话，建议用加氯化钠各种盐那个配方，在生物书里就能找到配方，因为带哪些盐的可能是模拟生物体系的，楼主主要做化学的话建议用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的配方，因为两种盐很便宜，用钾盐很贵的，而且不要用氢氧化钠调节pH的方法，从一个化学人角度讲，重复性不能保证，不知道回答满意否，再有问题再交流
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悲催莫过于让一个物化的去搞蛋白
7楼2011-05-07 09:43:56
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396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

【答案】应助回帖

这个要看楼主的实验用途了，我们实验室常用的PBS的配方是：KH2PO4  0.2g,  Na2HPO4.12H2O  2.9g  , NaCl  8.0g   KCl  0.2g。我们这个是用来溶解或者是做蛋白质的缓冲液的！不知道我的对楼主有没有帮助！
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人生的三大悲剧：不知道选择，不坚持选择，不断选择！
12楼2011-05-11 09:07:25
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mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
mier246(金币+1): 2011-05-08 16:43:58
silicare(金币+3): 鼓励交流 2011-05-09 18:09:03
嗯,其实缓冲液最重要的就是缓冲的这个体系,
至于你说的0.1M,可以根据配方,自己除下.这个摩尔的问题,相信随便抓个高中生都知道吧...
嗯,我们实验室用得是钾盐的配方,没觉得有什么问题,调pH用得是HCL，NaOH
一般不建议用其他的酸，如醋酸或者硫酸调
主要就是要注意这些个盐在溶液中电离的离子是否合适。
细胞么，不就是怕酸怕碱么。不就是怕搞不好脱水，或者溶胀么。。。
测酶活么，就要看看你的酶对某些离子有没敏感，有的话，大概那种配方就不能用了。
但是对钠钾敏感的似乎没有
放轻松，没多难，
另外，称量要准确和精确哟
溶水也要注意
加油~
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9楼2011-05-08 13:30:41
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bio_apai

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+5): 热心~ 2011-06-10 12:27:01
引用回帖:
Originally posted by mier246 at 2011-05-06 22:00:48:
请教各位，我做实验测定酶活性，需要用到0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（PH=7.4），但不知道配方，请问各位这种缓冲液该如何配置？急用，希望大家能帮帮我，多谢多谢

分子克隆实验指南第三版，1568页：
25度下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制；
先配0.1mol/L K2HPO4，0.1mol/L KH2PO4
配PH7.4，100ml磷酸钾缓冲液需：
0.1mol/L K2HPO4，80.2ml
0.1mol/L KH2PO4，19.8ml
混合即是，不用酸碱调PH。
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11楼2011-05-09 21:32:32
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
这个在网上百度谷歌一下很容易找到的，楼主自己发挥一下主观能动性吧
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2011-05-06 22:52:21
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by mier246 at 2011-05-06 22:00:48:
请教各位，我做实验测定酶活性，需要用到0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（PH=7.4），但不知道配方，请问各位这种缓冲液该如何配置？急用，希望大家能帮帮我，多谢多谢

浓度自己算  配方是称取 NaH2PO4或者KH2PO4 溶解，然后用磷酸调PH到7.4
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3楼2011-05-07 08:48:47
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mier246

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by starseacow at 2011-05-06 22:52:21:
这个在网上百度谷歌一下很容易找到的，楼主自己发挥一下主观能动性吧

我在网上查到了好多版本，有用磷酸氢二钠和磷酸二氢钾配置的，也有用磷酸二氢钾配置并用氢氧化钠调PH值的，还有用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠配置的，我都有点糊涂了，所以才会发帖问的------
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4楼2011-05-07 09:13:17
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mier246

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 小虫子666 at 2011-05-07 08:48:47:
浓度自己算  配方是称取 NaH2PO4或者KH2PO4 溶解，然后用磷酸调PH到7.4

可不可以用其他的酸调这种缓冲液的ＰＨ值呢？
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5楼2011-05-07 09:14:09
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zmw_520

禁虫 (小有名气)
mier246(金币+1): 2011-05-07 15:39:42
本帖内容被屏蔽
6楼2011-05-07 09:38:52
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smiles292

铁杆木虫 (正式写手)

暂无方向

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by mier246 at 2011-05-07 09:14:09:
可不可以用其他的酸调这种缓冲液的ＰＨ值呢？

对于磷酸盐缓冲液，建议调整两种盐的比例以达到不同pH值，不建议用酸碱调，但是对于超过能通过比例调节的范围的时候，可以通过酸碱来调节的
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悲催莫过于让一个物化的去搞蛋白
8楼2011-05-07 09:46:00
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by mier246 at 2011-05-07 09:14:09:
可不可以用其他的酸调这种缓冲液的ＰＨ值呢？

最好不用，用HCL 就成了磷酸盐-HCL缓冲液了。看看宝生物书后面的缓冲液配方也是要用浓磷酸调的。
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10楼2011-05-09 11:07:05
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