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liulanhua

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】PBS缓冲溶液高温灭菌后怎么变浑浊了呢?

按照《分子克隆》上配制的PBS缓冲溶液,经高温灭菌后变浑浊了,瓶底有析出物怎么回事?有遇到这种情况的吗?
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liulanhua(金币+1): 2011-03-09 18:20:00
是的,
按照分子克隆实验指南的配方配出来的PBS高压灭菌是会有沉淀的,
原因在于PH会发生微量改变,但是不会明显影响使用,
这个问题曾经困扰我们实验室很长时间,
过滤除菌就好了
14楼2011-03-09 17:42:24
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119904386

铁虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
前几天刚遇到过。完全按照分子克隆的配方。当时百思不得其解,又急着用,那个急啊


后来有人告诉我NaCl不好了。换了NaCl就好了,囧
18楼2013-03-20 14:20:24
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普通回帖

wangleisdnu

金虫 (正式写手)


liulanhua(金币+1): 2011-03-09 10:45:57
did you measure ph value?
2楼2011-03-08 21:22:34
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cjl2fl

金虫 (正式写手)


liulanhua(金币+1): 2011-03-09 10:46:06
一种是高温部分分解,但很少的。
最大的问题在于高温灭菌后,溶液的PH会改变
3楼2011-03-08 23:11:34
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zml2006009

木虫 (小有名气)


liulanhua(金币+1): 2011-03-09 10:46:12
没遇见过,ph是个问题,有些磷酸氢二钠是带12个结晶水的,所以最后母液的体积比要变.还有这些溶质都溶解了吗?估计也有可能是后者的原因。
4楼2011-03-08 23:34:09
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wuyucool

铁杆木虫 (著名写手)


liulanhua(金币+1): 2011-03-09 10:46:16
室温放一段时间应该就澄清了
5楼2011-03-09 09:22:30
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liulanhua

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-08 21:22:34:
did you measure ph value?

灭菌之前调的pH是7.4
6楼2011-03-09 10:47:05
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liulanhua

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by zml2006009 at 2011-03-08 23:34:09:
没遇见过,ph是个问题,有些磷酸氢二钠是带12个结晶水的,所以最后母液的体积比要变.还有这些溶质都溶解了吗?估计也有可能是后者的原因。

灭菌前使溶解了的。现在在室温放了几天了,摇晃瓶子后瓶底还是有未溶的东西
7楼2011-03-09 10:49:18
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liulanhua

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by wuyucool at 2011-03-09 09:22:30:
室温放一段时间应该就澄清了

你遇见过这种情况?现在在室温放了几天了,摇晃瓶子后瓶底还是有未溶的东西
8楼2011-03-09 10:49:58
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zml2006009

木虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那配母液的水是双蒸水吗?溶解一般也是要加热(微波或是水浴)。
9楼2011-03-09 15:15:40
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王庭

木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们以前自己配制的时候也遇到过这种情况,不过后来直接买袋装的PBS粉,直接溶于双蒸水灭菌就可以用的那种就没遇到过这种情况,但是在实验室静置一段时间后又会出现类似沉淀现象,不过可以用的说~
10楼2011-03-09 15:20:47
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wangleisdnu

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1x PBS
8 g NaCl
0.2 g KCl
1.44 g Na2HPO4
0.24 g KH2PO4

in 800 ml of distilled H2O.

Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave.


this is the receipt what i used
in my hand there was no problem.
is there some difference with yours
11楼2011-03-09 15:22:59
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liulanhua

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by 王庭 at 2011-03-09 15:20:47:
我们以前自己配制的时候也遇到过这种情况,不过后来直接买袋装的PBS粉,直接溶于双蒸水灭菌就可以用的那种就没遇到过这种情况,但是在实验室静置一段时间后又会出现类似沉淀现象,不过可以用的说~

可以用就好,那用之前是不是应该再加热溶解下啊?
12楼2011-03-09 17:01:20
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liulanhua

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-09 15:22:59:
1x PBS
8 g NaCl
0.2 g KCl
1.44 g Na2HPO4
0.24 g KH2PO4

in 800 ml of distilled H2O.

Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave.


this is the receipt wha ...

我实验室一直用的是娃哈哈纯净水,pH值在6左右,我配PBS溶液调pH到7.4是需要加碱的,加的是NaoH,这样配可以吗?
13楼2011-03-09 17:05:57
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liulanhua

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-03-09 17:42:24:
是的,
按照分子克隆实验指南的配方配出来的PBS高压灭菌是会有沉淀的,
原因在于PH会发生微量改变,但是不会明显影响使用,
这个问题曾经困扰我们实验室很长时间,
过滤除菌就好了

谢啦!不影响使用就好!
15楼2011-03-09 18:20:43
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luoleihao

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也遇到相同问题,我用的Sigma的PBS,高压灭菌也出现浑浊,而且浑浊的溶液不复溶。后来是通过过滤灭菌的。不知道这些混浊物是什么东西析出来了,没深究。在这里也向高手求教,谢谢。
16楼2011-03-09 22:24:05
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xifang8231

木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我们用的 PBS缓冲溶液也出现了沉淀现象,一直也不知道这些沉淀是什么,到底是怎么产生的,看了一些说是长得菌不知道是不是,也没能证明
17楼2011-12-14 09:12:59
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LYforever

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我现在也遇到这个问题,请问楼主你后来怎么解决的?
19楼2015-12-30 19:11:36
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青蛙里有只我

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我的出现白色沉淀后,pH从7.40降到6.96,过滤后降到6.84,会影响使用吗?还是不高温高压灭菌,直接放在4度的冰箱好一些吗?

发自小木虫IOS客户端
20楼2016-12-30 12:41:06
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