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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PBS缓冲溶液高温灭菌后怎么变浑浊了呢？
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liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PBS缓冲溶液高温灭菌后怎么变浑浊了呢？

按照《分子克隆》上配制的PBS缓冲溶液，经高温灭菌后变浑浊了，瓶底有析出物怎么回事？有遇到这种情况的吗？
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1楼 2011-03-08 21:09:38
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
liulanhua(金币+1): 2011-03-09 18:20:00
是的，
按照分子克隆实验指南的配方配出来的PBS高压灭菌是会有沉淀的，
原因在于PH会发生微量改变，但是不会明显影响使用，
这个问题曾经困扰我们实验室很长时间，
过滤除菌就好了
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14楼2011-03-09 17:42:24
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119904386

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
前几天刚遇到过。完全按照分子克隆的配方。当时百思不得其解，又急着用，那个急啊


后来有人告诉我NaCl不好了。换了NaCl就好了，囧
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18楼2013-03-20 14:20:24
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普通回帖

wangleisdnu

金虫 (正式写手)
liulanhua(金币+1): 2011-03-09 10:45:57
did you measure ph value?
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2楼2011-03-08 21:22:34
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cjl2fl

金虫 (正式写手)
liulanhua(金币+1): 2011-03-09 10:46:06
一种是高温部分分解，但很少的。
最大的问题在于高温灭菌后，溶液的PH会改变
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3楼2011-03-08 23:11:34
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zml2006009

木虫 (小有名气)
liulanhua(金币+1): 2011-03-09 10:46:12
没遇见过，ph是个问题，有些磷酸氢二钠是带12个结晶水的，所以最后母液的体积比要变.还有这些溶质都溶解了吗？估计也有可能是后者的原因。
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4楼2011-03-08 23:34:09
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wuyucool

铁杆木虫 (著名写手)
liulanhua(金币+1): 2011-03-09 10:46:16
室温放一段时间应该就澄清了
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5楼2011-03-09 09:22:30
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-08 21:22:34:
did you measure ph value?

灭菌之前调的pH是7.4
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6楼2011-03-09 10:47:05
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zml2006009 at 2011-03-08 23:34:09:
没遇见过，ph是个问题，有些磷酸氢二钠是带12个结晶水的，所以最后母液的体积比要变.还有这些溶质都溶解了吗？估计也有可能是后者的原因。

灭菌前使溶解了的。现在在室温放了几天了，摇晃瓶子后瓶底还是有未溶的东西
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7楼2011-03-09 10:49:18
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wuyucool at 2011-03-09 09:22:30:
室温放一段时间应该就澄清了

你遇见过这种情况？现在在室温放了几天了，摇晃瓶子后瓶底还是有未溶的东西
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8楼2011-03-09 10:49:58
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zml2006009

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
那配母液的水是双蒸水吗？溶解一般也是要加热（微波或是水浴）。
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9楼2011-03-09 15:15:40
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王庭

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们以前自己配制的时候也遇到过这种情况，不过后来直接买袋装的PBS粉，直接溶于双蒸水灭菌就可以用的那种就没遇到过这种情况，但是在实验室静置一段时间后又会出现类似沉淀现象，不过可以用的说~
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10楼2011-03-09 15:20:47
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wangleisdnu

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1x PBS
8 g NaCl
0.2 g KCl
1.44 g Na2HPO4
0.24 g KH2PO4

in 800 ml of distilled H2O.

Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave.


this is the receipt what i used
in my hand there was no problem.
is there some difference with yours
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11楼2011-03-09 15:22:59
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 王庭 at 2011-03-09 15:20:47:
我们以前自己配制的时候也遇到过这种情况，不过后来直接买袋装的PBS粉，直接溶于双蒸水灭菌就可以用的那种就没遇到过这种情况，但是在实验室静置一段时间后又会出现类似沉淀现象，不过可以用的说~

可以用就好，那用之前是不是应该再加热溶解下啊？
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12楼2011-03-09 17:01:20
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-09 15:22:59:
1x PBS
8 g NaCl
0.2 g KCl
1.44 g Na2HPO4
0.24 g KH2PO4

in 800 ml of distilled H2O.

Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave.


this is the receipt wha ...

我实验室一直用的是娃哈哈纯净水，pH值在6左右，我配PBS溶液调pH到7.4是需要加碱的，加的是NaoH，这样配可以吗？
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13楼2011-03-09 17:05:57
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-03-09 17:42:24:
是的，
按照分子克隆实验指南的配方配出来的PBS高压灭菌是会有沉淀的，
原因在于PH会发生微量改变，但是不会明显影响使用，
这个问题曾经困扰我们实验室很长时间，
过滤除菌就好了

谢啦！不影响使用就好！
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15楼2011-03-09 18:20:43
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luoleihao

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇到相同问题，我用的Sigma的PBS，高压灭菌也出现浑浊，而且浑浊的溶液不复溶。后来是通过过滤灭菌的。不知道这些混浊物是什么东西析出来了，没深究。在这里也向高手求教，谢谢。
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16楼2011-03-09 22:24:05
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xifang8231

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我们用的 PBS缓冲溶液也出现了沉淀现象，一直也不知道这些沉淀是什么，到底是怎么产生的，看了一些说是长得菌不知道是不是，也没能证明
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17楼2011-12-14 09:12:59
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LYforever

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我现在也遇到这个问题，请问楼主你后来怎么解决的？
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19楼2015-12-30 19:11:36
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青蛙里有只我

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我的出现白色沉淀后，pH从7.40降到6.96，过滤后降到6.84，会影响使用吗？还是不高温高压灭菌，直接放在4度的冰箱好一些吗？

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20楼2016-12-30 12:41:06
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