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js_yangbin金虫 (正式写手)
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[交流]
【求助】酶的提取缓冲液的问题 已有5人参与
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最近看了一些蛋白质提取相关的文献，经常会看到类似于下面的一些描述：取20 g西兰花种子，用液氮研磨成粉末，加60 mL提取缓冲液(O.2 mol／L Tris—HCI缓冲液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)。搅拌均匀后用8层纱布过滤，滤液在4℃下，12000 g离心20 min，收集 上清液作为黑芥子酶租提液(摘自一篇硕士论文) 其中60 mL提取缓冲液(O.2 mol／L Tris—HCI缓冲液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)看不明白啊，这个提取液是怎么配制的啊？ |
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silicare
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5楼2011-04-14 11:45:28
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+5, EPI+1): 专业 2011-04-14 11:42:45
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问： 其中60 mL提取缓冲液(O.2 mol／L Tris—HCI缓冲液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)看不明白啊，这个提取液是怎么配制的啊？ 如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量 将Tris-HCl 配成1M （或者0.5M）, 调整pH7.5，灭菌备用 如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量 EDTA 配成1M 或者0.1M 备 灭菌用 如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量 3 mmol／L DTT， 可配成100mM的母液，分装-20保存 如果你配制100ml 提取缓冲液，你知道应该怎么计算用量 5％甘油，为体积比 0.1mmo/L PMSF， 可以配成母液，也可以直接计算晶体用量 |
3楼2011-04-14 11:21:43
js_yangbin
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