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hkfgwww

银虫 (正式写手)

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[交流] 【求助】关于测序的大问题！！！

我有一个purF基因的序列在华大公司测序两次，这个片段连上T载体后前后两次测序结果不相同（有4个碱基突变，两次测序时间不同，不是同一批次的），这是什么原因呢？是测序的问题还是我实验的问题，并且这种情况经常遇见（以前的prs基因序列也有这种问题），我该如何解决呢？难道进行第三次测序？

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1楼 2011-04-10 16:02:16

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hkfgwww

银虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by xujian568 at 2011-04-12 01:27:36:
首先，关于你的克隆来源的问题。可能性之一是，本来就有不一样的。第二，（RT）PCR时用的是什么酶？taq还是别的？总的来说，千分之5左右的差异突变的概率是有的。第三，质粒或菌夜送测样品的质量。当然，最后就是 ...

基因组是同一批，用的保真酶。

～～～～～～～～～～～～～～～～～～
第三，质粒或菌夜送测样品的质量

这个与样品的质量相关吗？