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[交流]
【求助/交流】关于测序的问题 已有3人参与
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早上的帖子得到了各位虫友的建议，谢谢各位。 关于测序，我还有几个问题请教： 1） BigDye Terminator 操作中跑完PCR后需要提纯，请问提纯的过程中有什么需要注意的吗？例如我们实验室通常用的是100%酒精60ul和125mMEDTA 5ul加到20ul PCR反应产物中，然后室温放置15分钟（为什么？）然后4度 15000rpm 离心20分钟,去掉上清后，再加70%酒精离心10分钟，然后干燥，最后加25ul 去离子甲酰胺，存于-20度待测。 2）对于测序，为什么公司测的比自己测的好？测序操作中有哪些需要注意的？ 3）我的基因全长是1068bp,测序时是不是与小片断的测序条件不同？ |
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