应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于测序的问题
41/1返回列表
查看: 1036  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lnwtx

捐助贵宾 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于测序的问题 已有3人参与

早上的帖子得到了各位虫友的建议，谢谢各位。
关于测序，我还有几个问题请教：
1） BigDye Terminator 操作中跑完PCR后需要提纯，请问提纯的过程中有什么需要注意的吗？例如我们实验室通常用的是100%酒精60ul和125mMEDTA 5ul加到20ul PCR反应产物中，然后室温放置15分钟（为什么？）然后4度 15000rpm 离心20分钟,去掉上清后，再加70%酒精离心10分钟，然后干燥，最后加25ul 去离子甲酰胺，存于-20度待测。
2）对于测序，为什么公司测的比自己测的好？测序操作中有哪些需要注意的？
3）我的基因全长是1068bp,测序时是不是与小片断的测序条件不同？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
为了IF，努力向前冲！哈哈哈哈！
1楼 2010-05-20 14:09:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaiyf

金虫 (正式写手)
lnwtx(金币+1): 2010-05-21 08:46:27
测序公司测得应当没问题。只是大片段的话会在价钱上多一些。因为一个反应只能测 700bp左右吧
赞一下 回复此楼
多看文献，多学知识
2楼2010-05-20 15:04:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
lnwtx(金币+1): 2010-05-21 08:46:22
测序样本最好是用水溶，超过900bp最好正反测
赞一下 回复此楼
3楼2010-05-20 15:37:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herot

金虫 (小有名气)
★ ★
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-20 21:40:54
lnwtx(金币+1): 2010-05-21 08:46:17
1、如果不是要长时间（几年），大批量测序（每周都有几十上百个），没必要自己干，不划算；把测序条件摸索好、固定下来花费的时间、精力、金钱都不是小数目，测序仪更是大投入，而且摸索好了还未必传的下去，没必要。专业的事情就交给专业的公司去做，自己专心干一些公司做不了的更好。
2、测序公司专门干这个的，各个操作都非常熟练，各种条件也都摸透了，当然比自己测得好。
3、1kb的与小片段没什么不同，测双向就行了。
赞一下(1人) 回复此楼
树欲静而风不止
4楼2010-05-20 16:37:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lnwtx 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+7 David1982 2026-10-13 11/550 2026-10-15 10:30 by zyqchem
[职场人生] 40+中年人失业后，还能找到好工作吗？ +5 xqy2009 2026-10-13 5/250 2026-10-15 09:49 by 淘淘塑物性通
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭