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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于基因片段和测序问题求助！
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hnndpt

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于基因片段和测序问题求助！ 已有3人参与

用RAPD得到一个特异条带，关于对这个条带测序的问题，有点不明白：
1.割胶回收后能直接拿去测序吗？
2.还不知道片段的序列，能否连到载体里去测序？如果酶切后连到载体里，那么测出来的是序列全长吗？
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1楼 2010-10-19 16:25:47
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)
★
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-10-19 17:08:01
切胶后可以直接测序啊，如果连载体直接用平末端载体连就是了，无需酶切啊。
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2楼2010-10-19 17:04:07
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匿名

用户注销 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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3楼2010-10-19 17:16:43
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by hnndpt at 2010-10-19 16:25:47:
用RAPD得到一个特异条带，关于对这个条带测序的问题，有点不明白：
1.割胶回收后能直接拿去测序吗？
2.还不知道片段的序列，能否连到载体里去测序？如果酶切后连到载体里，那么测出来的是序列全长吗？

你做RAPD得到一个特异条带，看你的目的，你要是想知道他的完整的序列，你就老老实实的切胶连接转化，测序。

你要是对序列精度要求不高，没有二聚体，直接就用PCR产物测序就好，这样在开始的几十BP有缺失。你要提供测序引物的
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4楼2010-10-19 19:33:43
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
你要是再懒，还可以把胶给公司，叫他给你进行后续试验，测序，呵呵，其实也很合适的，也不贵。
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5楼2010-10-19 19:34:44
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