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hnndpt

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于基因片段和测序问题求助! 已有3人参与

用RAPD得到一个特异条带,关于对这个条带测序的问题,有点不明白:
1.割胶回收后能直接拿去测序吗?
2.还不知道片段的序列,能否连到载体里去测序?如果酶切后连到载体里,那么测出来的是序列全长吗?
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)


lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-10-19 17:08:01
切胶后可以直接测序啊,如果连载体直接用平末端载体连就是了,无需酶切啊。
2楼2010-10-19 17:04:07
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匿名

用户注销 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
本帖仅楼主可见
3楼2010-10-19 17:16:43
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taigongzaici

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by hnndpt at 2010-10-19 16:25:47:
用RAPD得到一个特异条带,关于对这个条带测序的问题,有点不明白:
1.割胶回收后能直接拿去测序吗?
2.还不知道片段的序列,能否连到载体里去测序?如果酶切后连到载体里,那么测出来的是序列全长吗?

你做RAPD得到一个特异条带,看你的目的,你要是想知道他的完整的序列,你就老老实实的切胶连接转化,测序。

你要是对序列精度要求不高,没有二聚体,直接就用PCR产物测序就好,这样在开始的几十BP有缺失。你要提供测序引物的
4楼2010-10-19 19:33:43
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taigongzaici

新虫 (小有名气)

你要是再懒,还可以把胶给公司,叫他给你进行后续试验,测序,呵呵,其实也很合适的,也不贵。
5楼2010-10-19 19:34:44
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