应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】DNA测序问题
161/1返回列表
查看: 2045  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】DNA测序问题

重组的质粒进行双酶切，发现有个酶切位点切不开。我想确认一下重组质粒是否发生突变，是不是需要进行DNA测序？是整个质粒都测还是可以测某一个片段啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-04-04 15:28:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
这个得看一下酶切位点的位置吧！
赞一下 回复此楼
2楼2011-04-04 18:34:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by blackrose8089 at 2011-04-04 18:34:00:
这个得看一下酶切位点的位置吧！

没明白什么意思?质粒里应该有BamHI酶切位点，但用这个酶怎么都切不开。就想测下序，看是否发生突变而导致这个位点没了。
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-05 11:16:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)
liulanhua(金币+1): 2011-04-05 11:27:02
在目的基因两边设计引物，PCR产物拿去测序，看酶切位点处是否突变掉了就可以。
赞一下 回复此楼
4楼2011-04-05 11:20:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-04-05 11:20:09:
在目的基因两边设计引物，PCR产物拿去测序，看酶切位点处是否突变掉了就可以。

必须还的设计引物啊？我不是学生物的，这对我来说好难啊！直接拿质粒去测序的话行吗？是不是很贵？
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-05 11:28:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)
★ ★
liulanhua(金币+1): 2011-04-05 15:10:23
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-04-05 19:17:10
那就让公司给你设计引物吧，你只要把质粒和部分序列给他们就可以了。不用整个质粒都测序，只把你要的那一部分测一下就可以了。一个反应二三十块钱，不贵，可以测七八百个碱基。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-04-05 12:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-04-05 12:46:59:
那就让公司给你设计引物吧，你只要把质粒和部分序列给他们就可以了。不用整个质粒都测序，只把你要的那一部分测一下就可以了。一个反应二三十块钱，不贵，可以测七八百个碱基。

谢啦！
回复此楼
7楼2011-04-05 15:10:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfebst

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~~ 2011-04-05 19:17:22
是否甲基化了，才切不开的？还是你试验的时候酶切条件和时间没掌握好？
根据质粒序列设计引物测序就好吧，不用全测
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-04-05 18:02:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wolfebst at 2011-04-05 18:02:01:
是否甲基化了，才切不开的？还是你试验的时候酶切条件和时间没掌握好？
根据质粒序列设计引物测序就好吧，不用全测

试了好几个条件 也重复了 都不行 准备测序看看
赞一下 回复此楼
9楼2011-04-05 19:38:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwu3660

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你看一下质粒图谱是不是有通用的测序引物，或者你告诉测序的公司你质粒的名称，他们知道是不是有通用测序引物，如果有直接送去就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-04-06 17:15:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wuwu3660 at 2011-04-06 17:15:25:
你看一下质粒图谱是不是有通用的测序引物，或者你告诉测序的公司你质粒的名称，他们知道是不是有通用测序引物，如果有直接送去就可以了

恩 已经跟测序公司联系了，谢谢指点
赞一下 回复此楼
11楼2011-04-07 08:12:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wazlf

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~ 2011-04-18 13:26:50
查一下你的质粒是哪个型号的，就可以查大你的质粒的基因序列，然后再根据目的基因购买酶，测序不一定能解决根本问题！
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2011-04-13 10:56:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wazlf at 2011-04-13 10:56:41:
查一下你的质粒是哪个型号的，就可以查大你的质粒的基因序列，然后再根据目的基因购买酶，测序不一定能解决根本问题！

没明白什么意思？我的质粒的基因序列是知道的，目的基因也知道，都是从基因库里查到的。
赞一下 回复此楼
13楼2011-04-18 10:59:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-04-05 12:46:59:
那就让公司给你设计引物吧，你只要把质粒和部分序列给他们就可以了。不用整个质粒都测序，只把你要的那一部分测一下就可以了。一个反应二三十块钱，不贵，可以测七八百个碱基。

今天拿到测序结果了，不知道怎么分析，看大家说的什么在NCBI上进行比对，我的只是想看序基因序列有没有突变，该怎么看啊？请高手指点一下。多谢！
赞一下 回复此楼
14楼2011-04-18 11:01:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
把你的序列打开，搜索酶的位点，如果还在，那就没有突变，如果不在，那就默哀呗，记得双链都要搜索，才好确认。
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2011-04-18 16:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suenmomo

金虫 (小有名气)
质粒上的酶切位点基本不会发生突变的啊！
应该是甲基化或者其他问题
测序你直接把质粒给公司就可以了
赞一下 回复此楼
16楼2011-04-19 11:29:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liulanhua 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 275求调剂 +3 太阳花天天开心 2026-03-16 3/150 2026-03-17 08:01 by 热情沙漠
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗？ 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 0805，333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 085602化工求调剂 +7 董boxing 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:07 by BruceLiu320
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭