应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】DNA测序问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
161/1返回列表
查看: 2087  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】DNA测序问题

重组的质粒进行双酶切，发现有个酶切位点切不开。我想确认一下重组质粒是否发生突变，是不是需要进行DNA测序？是整个质粒都测还是可以测某一个片段啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-04-04 15:28:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
这个得看一下酶切位点的位置吧！
赞一下 回复此楼
2楼2011-04-04 18:34:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by blackrose8089 at 2011-04-04 18:34:00:
这个得看一下酶切位点的位置吧！

没明白什么意思?质粒里应该有BamHI酶切位点，但用这个酶怎么都切不开。就想测下序，看是否发生突变而导致这个位点没了。
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-05 11:16:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)
liulanhua(金币+1): 2011-04-05 11:27:02
在目的基因两边设计引物，PCR产物拿去测序，看酶切位点处是否突变掉了就可以。
赞一下 回复此楼
4楼2011-04-05 11:20:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-04-05 11:20:09:
在目的基因两边设计引物，PCR产物拿去测序，看酶切位点处是否突变掉了就可以。

必须还的设计引物啊？我不是学生物的，这对我来说好难啊！直接拿质粒去测序的话行吗？是不是很贵？
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-05 11:28:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)
★ ★
liulanhua(金币+1): 2011-04-05 15:10:23
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-04-05 19:17:10
那就让公司给你设计引物吧，你只要把质粒和部分序列给他们就可以了。不用整个质粒都测序，只把你要的那一部分测一下就可以了。一个反应二三十块钱，不贵，可以测七八百个碱基。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-04-05 12:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-04-05 12:46:59:
那就让公司给你设计引物吧，你只要把质粒和部分序列给他们就可以了。不用整个质粒都测序，只把你要的那一部分测一下就可以了。一个反应二三十块钱，不贵，可以测七八百个碱基。

谢啦！
回复此楼
7楼2011-04-05 15:10:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfebst

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~~ 2011-04-05 19:17:22
是否甲基化了，才切不开的？还是你试验的时候酶切条件和时间没掌握好？
根据质粒序列设计引物测序就好吧，不用全测
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-04-05 18:02:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wolfebst at 2011-04-05 18:02:01:
是否甲基化了，才切不开的？还是你试验的时候酶切条件和时间没掌握好？
根据质粒序列设计引物测序就好吧，不用全测

试了好几个条件 也重复了 都不行 准备测序看看
赞一下 回复此楼
9楼2011-04-05 19:38:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwu3660

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你看一下质粒图谱是不是有通用的测序引物，或者你告诉测序的公司你质粒的名称，他们知道是不是有通用测序引物，如果有直接送去就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-04-06 17:15:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wuwu3660 at 2011-04-06 17:15:25:
你看一下质粒图谱是不是有通用的测序引物，或者你告诉测序的公司你质粒的名称，他们知道是不是有通用测序引物，如果有直接送去就可以了

恩 已经跟测序公司联系了，谢谢指点
赞一下 回复此楼
11楼2011-04-07 08:12:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wazlf

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~ 2011-04-18 13:26:50
查一下你的质粒是哪个型号的，就可以查大你的质粒的基因序列，然后再根据目的基因购买酶，测序不一定能解决根本问题！
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2011-04-13 10:56:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wazlf at 2011-04-13 10:56:41:
查一下你的质粒是哪个型号的，就可以查大你的质粒的基因序列，然后再根据目的基因购买酶，测序不一定能解决根本问题！

没明白什么意思？我的质粒的基因序列是知道的，目的基因也知道，都是从基因库里查到的。
赞一下 回复此楼
13楼2011-04-18 10:59:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-04-05 12:46:59:
那就让公司给你设计引物吧，你只要把质粒和部分序列给他们就可以了。不用整个质粒都测序，只把你要的那一部分测一下就可以了。一个反应二三十块钱，不贵，可以测七八百个碱基。

今天拿到测序结果了，不知道怎么分析，看大家说的什么在NCBI上进行比对，我的只是想看序基因序列有没有突变，该怎么看啊？请高手指点一下。多谢！
赞一下 回复此楼
14楼2011-04-18 11:01:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
把你的序列打开，搜索酶的位点，如果还在，那就没有突变，如果不在，那就默哀呗，记得双链都要搜索，才好确认。
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2011-04-18 16:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suenmomo

金虫 (小有名气)
质粒上的酶切位点基本不会发生突变的啊！
应该是甲基化或者其他问题
测序你直接把质粒给公司就可以了
赞一下 回复此楼
16楼2011-04-19 11:29:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liulanhua 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂，一志愿厦门大学，生物与医药，总分272，本科211 +4 Electron1cc 2026-04-01 5/250 2026-04-06 10:45 by barlinike
[考研] 0703化学 +9 goldtt 2026-04-02 11/550 2026-04-06 10:35 by 无际的草原
[考研] 材料调剂 +14 壹贰贰亿 2026-04-04 14/700 2026-04-05 23:31 by 来看流星雨10
[考研] 348求调剂 +6 wukira 2026-04-04 6/300 2026-04-05 18:11 by 猪会飞
[考研] 材料工程310专硕调剂 +13 捞捞我…. 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:01 by 来看流星雨10
[考研] 材料与化工306分找调剂 +12 沧海轻舟e 2026-04-03 13/650 2026-04-04 23:45 by lqwchd
[考研] 11408,335分，本科211，求调剂，可转专业 +5 鳄梨大鳄鱼 2026-04-03 5/250 2026-04-04 22:49 by chongya
[考研] 材料专硕306英一数二 +8 z1z2z3879 2026-03-31 8/400 2026-04-04 22:08 by hemengdong
[考研] 294求调剂 +6 Grey_Ey 2026-04-02 9/450 2026-04-04 22:07 by hemengdong
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 0703求调剂 +6 zizimo 2026-03-31 6/300 2026-04-04 14:16 by 无际的草原
[考研] 本科211，专业085404，293分请求调剂 +5 莲菜就是藕吧 2026-04-04 5/250 2026-04-04 14:08 by 这是一个无聊的�
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +5 redcom 2026-04-01 6/300 2026-04-03 15:15 by Howard28
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-04-02 3/150 2026-04-03 08:44 by yulian1987
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:03 by yulian1987
[考研] 【求调剂】新能源材料本科，一志愿211，初试321 +6 求调剂学校， 2026-04-02 6/300 2026-04-02 09:41 by 晴空210210
[考研] 江苏科技大学招材料研究生 +4 Su032713. 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:03 by cccchenso
[考研] 一志愿西电085401数一英一299求调剂 六级521 +4 爱吃大鸭梨 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:51 by 搏击518
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭