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liulanhua

金虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】DNA测序问题

重组的质粒进行双酶切，发现有个酶切位点切不开。我想确认一下重组质粒是否发生突变，是不是需要进行DNA测序？是整个质粒都测还是可以测某一个片段啊？

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1楼 2011-04-04 15:28:27

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郝钊

金虫 (小有名气)

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★ ★
liulanhua(金币+1): 2011-04-05 15:10:23
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-04-05 19:17:10

那就让公司给你设计引物吧，你只要把质粒和部分序列给他们就可以了。不用整个质粒都测序，只把你要的那一部分测一下就可以了。一个反应二三十块钱，不贵，可以测七八百个碱基。

赞一下(1人)

6楼2011-04-05 12:46:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 16 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

这个得看一下酶切位点的位置吧！

2楼2011-04-04 18:34:00

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liulanhua

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by blackrose8089 at 2011-04-04 18:34:00:
这个得看一下酶切位点的位置吧！

没明白什么意思?质粒里应该有BamHI酶切位点，但用这个酶怎么都切不开。就想测下序，看是否发生突变而导致这个位点没了。

3楼2011-04-05 11:16:35

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郝钊

金虫 (小有名气)

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liulanhua(金币+1): 2011-04-05 11:27:02

在目的基因两边设计引物，PCR产物拿去测序，看酶切位点处是否突变掉了就可以。

4楼2011-04-05 11:20:09

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